單位g/100ml)百分比濃度或體積/體積(v/v，單位ml/100ml)百分比濃度。實(shí)施例中描述到的各種生物材料的取得途徑*是提供一種實(shí)驗(yàn)獲取的途徑以達(dá)到具體公開(kāi)的目的，不應(yīng)成為對(duì)本發(fā)明生物材料來(lái)源的限制。事實(shí)上，所用到的生物材料的來(lái)源是廣大的，任何不違反法律和道德倫理能夠獲取的生物材料都可以按照實(shí)施例中的提示替換使用，好的細(xì)小病菌價(jià)錢(qián)。所用引物由上海生工有限公司合成；所用探針由上海生工基因公司合成。實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，好的細(xì)小病菌價(jià)錢(qián)，實(shí)施例將有助于理解本發(fā)明，但不應(yīng)作為對(duì)本發(fā)明內(nèi)容的限制。實(shí)施例1、設(shè)計(jì)引物和taqman探針從ncbi的核酸數(shù)據(jù)庫(kù)genbank(.)分別檢索獲得cavii型的hexon區(qū)域基因(cavii型genbank號(hào)：，列表中sedid**)的序列、cdv的h基因(cdvgenbank號(hào)：，序列表中sedidno：2)的序列、cpv型的vp2基因(cpvgenbank號(hào)：，序列表中sedidno：3)的序列、cpiv型的np基因(cpivgenbank號(hào)：，序列表中sedidno：4)的序列，用dnaman軟件進(jìn)行比對(duì)后，好的細(xì)小病菌價(jià)錢(qián)，根據(jù)引物、taqman探針設(shè)計(jì)原則，在充分考慮四種bingdu保守區(qū)的差異的基礎(chǔ)上，**終確定：cavii的檢測(cè)序列為ii型cavhexon基因5’端第1765-1960位堿基，序列表中sedidno：5所示。

 90日齡以上的犬免疫兩次，每次間隔為2-4周，每次注射1毫升。2，當(dāng)犬群暴發(fā)本病后，應(yīng)及時(shí)隔離，對(duì)哈士奇的狗窩和飼具，用2-4%燒堿、1%福爾馬林、(32倍稀釋)反復(fù)消毒。對(duì)無(wú)治yu可能的犬，應(yīng)盡早撲殺，焚燒深埋。第三，對(duì)輕癥病例，應(yīng)采取對(duì)癥療法和支持療法。對(duì)于腸炎型病例，因脫水失鹽過(guò)多，及時(shí)適量補(bǔ)液顯得十分重要。為了防止繼發(fā)染上，應(yīng)按時(shí)注射抗生su。也可應(yīng)用抗犬細(xì)小病du高免血清進(jìn)行治聊，其用量為：每犬皮下或肌肉注射5-10毫升，每日或隔日注射1次，連續(xù)2-3次。三、防治“犬細(xì)小病du”的中藥療法(偏方)：“白烏湯”方劑：白頭翁15克，烏梅15克、黃連5克、黃柏5克、郁金10克，訶子10克。用法：加水1000克，煎數(shù)沸，取湯汁候溫灌服，每日一劑。如病犬嘔吐過(guò)于劇烈，可在灌服前2小時(shí)左右先注射胃復(fù)安注射液;如病犬脫水嚴(yán)重，應(yīng)輔以輸液治聊。好了，哈士奇翻腸子的原因介紹到這里，你覺(jué)得怎么樣?如果有興趣，你可以看看有關(guān)哈士奇喂養(yǎng)和疾病的知識(shí)，比如哈士奇幼犬的喂養(yǎng)，以及哈士奇的常見(jiàn)疾病。

述的引物和taqman探針組的引導(dǎo)下進(jìn)行四重實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)束后，以各標(biāo)準(zhǔn)品的濃度log值(x軸)對(duì)其相應(yīng)ct值(y軸)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)提取待測(cè)樣品的基因組dna或rna，以提取的基因組dna或rna為模板，在上述的引物和taqman探針組的引導(dǎo)下進(jìn)行四重實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)；3)用得到的ct值或熒光信號(hào)的變化實(shí)現(xiàn)對(duì)犬腺bingduii型、犬細(xì)小bingdu、犬瘟熱bingdu和犬副流感bingdu的定性檢測(cè)，再根據(jù)熒光信號(hào)的強(qiáng)度和步驟1)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出待測(cè)樣品中所含犬腺bingduii型、犬細(xì)小bingdu、犬瘟熱bingdu和犬副流感bingdu的拷貝數(shù)，實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。上述步驟1)和步驟2)中的25μl實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)體系包括：模板5μl、實(shí)時(shí)熒光定量pcr反應(yīng)液2×onestepu+μl(購(gòu)于vazyme公司)、onestepu+μl(購(gòu)于vazyme公司)、10μm-4×混合引物μl、10μm-4×混合探針μl，rna-freeh2o5μl；上述步驟1)和步驟2)中的四重實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)條件為：反轉(zhuǎn)錄52℃15min，95℃2min；pcr擴(kuò)增95℃15s，52℃30s，45個(gè)循環(huán)。上述步驟3)中的判定方法為：若待測(cè)樣品在cpiv-p的5’端所標(biāo)記的熒光報(bào)告基團(tuán)所對(duì)應(yīng)的通道中的擴(kuò)增曲線為標(biāo)準(zhǔn)的s型曲線，且ct值≤32，則結(jié)果判定為cpivbingdu陽(yáng)性。

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