紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的特點(diǎn)分光光度法對(duì)于分析人員來(lái)說(shuō)，可以說(shuō)是常用和有效的工具之一。幾乎每一個(gè)分析實(shí)驗(yàn)室都離不開(kāi)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，常用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。分光光度法具有以下主要特點(diǎn)。

1靈敏度高

由于新的顯色劑的大量合成，并在應(yīng)用研究方面取得了可喜的進(jìn)展，使得對(duì)元素測(cè)定的靈敏度有所推進(jìn)，特別是有關(guān)多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究，使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到數(shù)十萬(wàn)。

2選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定，如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定，已有比較滿意的方法了。

3準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法，其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1～3%范圍內(nèi)，如采用示差分光光度法進(jìn)行測(cè)量，則誤差可減少到0，常用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì).X%。

4適用濃度范圍廣

可從常量(1%～50%)(尤其使用示差法)到痕量(10-8～10-6%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

5分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速、應(yīng)用廣

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收，常用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止，幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。在國(guó)際上發(fā)表的有關(guān)分析的論文總數(shù)中，光度法約占28%，我國(guó)約占所發(fā)表論文總數(shù)的33%。 測(cè)量吸光度并不是測(cè)量透過(guò)吸收池的光強(qiáng)度，而是將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換成電流進(jìn)行測(cè)量，稱為紫外分光光度計(jì)的檢測(cè)器。常用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

掌握紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)基本工作原理：一定頻率紫外可見(jiàn)光照射所需要分析的目標(biāo)樣品，引起目標(biāo)樣品中價(jià)電子發(fā)生躍遷，從而變現(xiàn)隨著吸收波長(zhǎng)變化而引起光譜變化，形成可供分析數(shù)據(jù)。

以朗伯-比耳定律(Lambert-beer)為理論基礎(chǔ)，特定波長(zhǎng)吸收中，吸收程度正比于試樣成分濃度，因此，可進(jìn)行光譜的定性分析。且根據(jù)吸收與已知濃度標(biāo)樣比較，能進(jìn)行定量分析。

紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)種類(lèi)及優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比：傳統(tǒng)機(jī)型：?jiǎn)喂馐鳸V、全程密閉、以光柵進(jìn)行分光，標(biāo)樣和測(cè)試樣品分別測(cè)試，全波段掃描時(shí)間至多2min；比例雙光束UV：?jiǎn)喂馐鳸V，全程密閉、經(jīng)光柵再經(jīng)棱鏡，全程密閉、標(biāo)樣和測(cè)試樣品分別測(cè)試、測(cè)試靈敏度降低，全波段分析時(shí)間長(zhǎng)。 國(guó)產(chǎn)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)儀器紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率相當(dāng)高的分析儀器。

當(dāng)以空白試劑為參比調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)時(shí)，比色皿窗材料的吸收、內(nèi)外窗面的散射以及溶劑的吸收等都被抵消，所得吸光度值完全由顯色溶液中待測(cè)離了濃度所決定。此時(shí)吸光度值與試液濃度一般呈線性關(guān)系。吸光度值與測(cè)定濃度不成直線關(guān)系，發(fā)生向下彎曲(負(fù)偏離)或向上彎曲(正偏離)的現(xiàn)象而偏離朗伯一比爾定律的主要原因如下。

(1)非單色光的影響：紫外一可見(jiàn)分光光度訃使用連續(xù)光源和分光器分光，不可能得到真正理想的單色光；為保證在測(cè)量中能得到充分的光強(qiáng)，儀器必須保持一定的狹縫寬度。由狹縫射出后投射到被測(cè)物質(zhì)上的光，是一個(gè)有限寬度的譜帶——光譜通帶。隨光譜通帶寬度的增大，吸收光譜的分辨率降低，并偏離朗伯一比爾定律。

(2)非吸收光的影響：當(dāng)來(lái)自出射狹縫的光的光譜通帶寬度大于吸收光譜譜帶時(shí)，投射在被測(cè)物質(zhì)上的光就含有非吸收光。這不僅能使靈敏度降低，且能使校準(zhǔn)曲線向橫坐標(biāo)軸彎曲而偏離朗伯一比爾定律。

紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜，來(lái)研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見(jiàn)光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。

環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開(kāi)關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一：

紫外分光光度計(jì)儀器使用一定周期后，內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃，由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開(kāi)啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作：

將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔，必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn)，對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤(rùn)滑。恢復(fù)原狀，再進(jìn)行一些必要的檢測(cè)、調(diào)校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護(hù)和對(duì)主要技術(shù)指標(biāo)的簡(jiǎn)易測(cè)試方法，自己經(jīng)常對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)和測(cè)試，以保證儀器工作在良好狀態(tài)。 傳統(tǒng)單光束UV紫外測(cè)試，測(cè)試過(guò)程全程封閉，單光束光源只通過(guò)光柵直接照射樣品，再經(jīng)光電倍增管檢測(cè)器檢測(cè)。

如何正確使用752N紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

A：在使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí)候，設(shè)備儀器使用之前，一定需要能夠把樣品室內(nèi)存放的防潮劑給拿出來(lái)，且在設(shè)備正常運(yùn)轉(zhuǎn)檢查時(shí)候也不能開(kāi)啟樣品室蓋；在檢查時(shí)候需注意比色皿當(dāng)中的液體要能占總體積的百分之六十六到百分之八十比較好，千萬(wàn)不能讓液體太多以至于液體外泄直接腐蝕儀器設(shè)備。

當(dāng)然在進(jìn)行正常檢測(cè)時(shí)候，也要能確保比色皿干凈，當(dāng)發(fā)現(xiàn)內(nèi)壁上有液滴就許使用專業(yè)的紙張給擦拭干凈，建議大家千萬(wàn)不要使用手直接擦拭，以免造成對(duì)手的傷害。

B：在使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí)，儀器設(shè)備在正常運(yùn)轉(zhuǎn)的時(shí)候，一定要嚴(yán)禁把液體溶劑給直接放置于儀器的表層上，如果發(fā)現(xiàn)有溶劑液體出現(xiàn)外泄的情況，一定要進(jìn)行及時(shí)的清潔和處理。

C：當(dāng)使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)完畢后，還需要能夠及時(shí)把比色皿內(nèi)的液體給妥善處理掉，并還需要能夠使用蒸餾水給徹底清潔干凈，同時(shí)將比色皿進(jìn)行倒置晾干處理；全部工作完成后還需把設(shè)備儀器電源給關(guān)閉，再將防潮劑放入到樣品室內(nèi)并做好防塵處理才好。 現(xiàn)在的許多紫外分光光度計(jì)裝的是“長(zhǎng)壽”型燈源，據(jù)說(shuō)氘燈可達(dá)2000小時(shí)，鎢燈3000小時(shí)。國(guó)產(chǎn)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)儀器

光學(xué)構(gòu)造和光源、探測(cè)方法、樣品類(lèi)型和數(shù)據(jù)處理等都是要考慮的因素。常用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

使用紫外分光光度計(jì)的過(guò)程中，經(jīng)常會(huì)遇到儀器因光源達(dá)不到要求，需要進(jìn)行調(diào)修。要求光源燈處不能有空氣流動(dòng)，因?yàn)閱喂馐鴥x器很忌諱空氣快速流動(dòng)而使光源燈的色溫發(fā)生變化。如遇電壓正常而鎢燈不亮?xí)r，就需要更換鎢燈。更換時(shí)，不要用手直接接觸燈泡表面，如果手指摸過(guò)，應(yīng)用無(wú)水乙醇和C4H10O混合液擦拭干凈，否則通電后指印遇熱不能去除。安裝光源燈后要注意調(diào)整光路。光源燈有兩個(gè)引線頭，安裝時(shí)用導(dǎo)線焊接，主要是防止接觸不良而造成的光源發(fā)光不穩(wěn)現(xiàn)象。在焊接時(shí)防止焊點(diǎn)與燈頭銅皮碰上，裝上燈座使電源短路。燈絲要求平直，如果燈絲彎曲，會(huì)影響光能量。燈絲的位置要與入射狹縫平行并對(duì)準(zhǔn)，上、下、左、右調(diào)節(jié)后緊固螺釘。擰緊燈座的螺紋套，可用鉗子擰緊，一般燈頭盡量往燈座里塞，因?yàn)槎鄶?shù)燈絲離燈頭偏高。調(diào)整燈位置的前后可移動(dòng)整個(gè)燈座架，它下面有三個(gè)固定螺釘，先稍松后，移動(dòng)前后位置再固定。一般調(diào)節(jié)鎢燈的位置時(shí)，將波長(zhǎng)調(diào)到580nm處，狹縫調(diào)到MAX，把一張白紙置于比色皿盒邊出口處，觀察白紙上的光斑。若光斑上方左右角均不完整成半圓弧，可能是光源燈高度不對(duì)；光斑左邊或右邊不完整，可調(diào)光源燈底座位置。調(diào)整至白紙上可見(jiàn)明亮、均勻的長(zhǎng)方形黃橙色光斑。 常用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

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