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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商,RNA提取試劑
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詳細(xì)說(shuō)明
RNA提取注意事項(xiàng):使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買**提取試劑盒, 如果不是**試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析,無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商、分子克隆等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。當(dāng)前提取效果好的是RNA提取試劑盒,但其售價(jià)較高,單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大,對(duì)精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒有必要購(gòu)買,當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長(zhǎng)的問題(如果碰上國(guó)內(nèi)無(wú)貨的時(shí)候,要從國(guó)外發(fā)貨,會(huì)等很長(zhǎng)一段時(shí)間)。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國(guó)產(chǎn)的試劑盒就足以,無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商,價(jià)格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨(國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯(cuò),性價(jià)比還可以,無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商。所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學(xué)后實(shí)驗(yàn)。無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過(guò)異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì)。無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)有效的方法。
細(xì)胞RNA提取的方法:實(shí)驗(yàn)提取步驟:標(biāo)準(zhǔn)Trizol提取步驟為 液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細(xì)胞培養(yǎng)皿置于冰上,加入Trizol裂解5-10分鐘,用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進(jìn)口EP管中。加入1/5體積的氯仿,上下混勻液體,4度靜置10-15分鐘。(氯仿為有機(jī)溶劑,有效的使有機(jī)相和無(wú)機(jī)相迅速分離。有機(jī)相中主要是酚和蛋白結(jié)合,從而使得蛋白和RNA脫離,RNA進(jìn)入水相)。4度離心15分鐘,一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層,RNA在上清里,從離心機(jī)輕輕拿出EP管,以免管內(nèi)物質(zhì)震蕩導(dǎo)致下層沉淀激起。吸取上清的時(shí)候一定要?jiǎng)幼鬏p柔,切忌吸取太多,一般吸到400-500ul,避免吸到下層沉淀,將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇,4度靜置10min,然后12000rpm離心10min。
RNA試劑盒:用于各種植物、動(dòng)物、微生物的RNA提取,在每個(gè)試劑盒里都有一份說(shuō)明使用說(shuō)明書。實(shí)驗(yàn)者只需要按照說(shuō)明書上的步驟操作即可。使用時(shí)無(wú)需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學(xué)后實(shí)驗(yàn)。但較好的試劑盒價(jià)格比較貴,在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來(lái)定奪試劑盒的使用。注意事項(xiàng)所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為RNase-free產(chǎn)品,操作過(guò)程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測(cè)。使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購(gòu)買**提取試劑盒, 如果不是**試劑盒。
環(huán)狀RNA是一類產(chǎn)生于RNA剪切過(guò)程中的封閉喚醒RNA分子,主要由外顯子和(或)內(nèi)含子構(gòu)成。環(huán)狀RNA參與了復(fù)雜的RNA-RNA的相互作用網(wǎng)絡(luò),在基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中發(fā)揮作用;環(huán)狀RNA可直接與蛋白質(zhì)結(jié)合,也可通過(guò)RNA介導(dǎo)間接與蛋白質(zhì)發(fā)生關(guān)聯(lián),影響蛋白質(zhì)功能;部分環(huán)狀RNA具有翻譯功能。研究發(fā)現(xiàn),環(huán)狀RNA與一些疾病的發(fā)生、發(fā)展具有直接關(guān)聯(lián),為一些疾病發(fā)病機(jī)制提供了新思路,除此之外,環(huán)狀RNA 在與衰老、炎癥等生理、病理現(xiàn)象方面也有重大應(yīng)用。在細(xì)胞中,RNA種類繁多。根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商
可以用260nm波長(zhǎng)分光測(cè)定RNA濃度,OD值為1相當(dāng)于大約40μg/ml的單鏈RNA。無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商
RNA提取實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:研缽150度烘烤4小時(shí),離心管、吸頭用DEPC處理;操作過(guò)程更是要求必須在超凈臺(tái)進(jìn)行或者在RNA提取專區(qū)進(jìn)行,離心機(jī)、移液器、試劑**,帶口罩、帽子,屏住呼吸、不說(shuō)話,帶乳膠手套并要時(shí)常更換。這樣做無(wú)非是聽說(shuō)RNase很不好(書本上或者網(wǎng)上“RNA提取注意事項(xiàng)”),無(wú)處不在,所以到處都要擦的bling bling才能做實(shí)驗(yàn),好像空氣中的RNase都能炸出汁的樣子。RNase主要來(lái)自樣品的細(xì)胞。如果按比例來(lái)說(shuō)的的話,細(xì)胞內(nèi)源性的RNase占99.9%,實(shí)驗(yàn)環(huán)境的RNase占0.01%,一般可以忽略不計(jì)。所以,研缽洗干凈、烘干即可。買點(diǎn)無(wú)酶的吸頭、離心管,找一個(gè)普通的試驗(yàn)臺(tái),穿好實(shí)驗(yàn)服戴好手套,保護(hù)好自己就好??谡謵蹘Р粠В鰧?shí)驗(yàn)時(shí)高冷一點(diǎn),不要指點(diǎn)江山,唾沫橫飛即可。如果做實(shí)驗(yàn)時(shí)必須要用到trizol(主要成分苯酚)、氯仿、B-巰基乙醇等易揮發(fā)有毒試劑時(shí),帶口罩可以保護(hù)自己哦。無(wú)錫RNA提取試劑供應(yīng)商
蘇州君欣生物科技有限公司位于江蘇省張家港市塘橋鎮(zhèn)東城科技創(chuàng)業(yè)園C幢二樓。公司業(yè)務(wù)分為原代細(xì)胞,無(wú)血清細(xì)胞凍存液,干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,動(dòng)物疾病模型等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在精細(xì)化學(xué)品深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造精細(xì)化學(xué)品良好品牌。蘇州君欣生物科技憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來(lái)的聲譽(yù)和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。
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