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***更新:2021-01-01 04:12:38
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詳細說明
外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯狀形態(tài)、雙層膜結構,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括一些病癥細胞在內幾乎所有類型的細胞(免疫細胞、神經細胞、干細胞),都可以產生并釋放exosome。Exosome內含有與細胞來源相關的蛋白質rRNA和microRNA,Exosome可通過細胞膜受體直接啟動受體細胞,也可運輸蛋白質、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA,甚至細胞器進入受體細胞,參與細胞間通訊。Exosome在免疫應答、炎癥反應、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關鍵作用,不同細胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,可作為多種疾病的早期診斷標記物,天津外泌體提取試劑廠家,也能作為靶向藥物的載體進行疾病治病。miRNA是一類22nt左右大小的非編碼分子,它可以通過外泌體從一個地方轉運到另外一個地方行使基因沉默功能。通過檢測外泌體中miRNA表達變化,天津外泌體提取試劑廠家,天津外泌體提取試劑廠家,可以發(fā)現外泌體中miRNA特異性功能。重復離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質量。天津外泌體提取試劑廠家
外泌體在肺病治病中的作用:目前外科手術仍是肺病治病的較有效方法,但術后復發(fā)率很高,而傳統(tǒng)放化療對肺病的治病效果又極其有限。因此,肺病治病的新模式受到廣大研究者的關注,已有大量研究證明外泌體在肺病治病中有廣闊的應用前景。外泌體作為細胞間通訊的一種形式,在肺病的進程中具有重要作用,因此,控制外泌體的分泌可能成為治病肺病的潛在靶點。據相關報道稱,EPI64可以通過啟動特異的GAP和Rab27A來控制A549肺病細胞的外泌體分泌,提示EPI64可以作為治病的潛在靶點。此外,CD9、CD63、HSP90和HSP70在外泌體中富集,從而上調主要組織相容性復合物Ⅱ類分子表達水平,顯著促進CD4+T細胞的增殖,通過免疫途徑壓制一些病癥。理論上,所有促進肺病細胞分泌外泌體的機制都可以被用來作為肺病治病的潛在靶點,但目前關于其可行性的研究還比較少。天津外泌體提取試劑將沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層。
目前的主流觀點認為,外泌體的產生過程為:細胞膜內陷,形成內體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細胞的多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體較早見于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中發(fā)現了有膜結構的小囊泡,并命名為exosome。對于外泌體的作用,當時推測為細胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現類似于B淋巴細胞的免疫細胞也會分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應CD4+細胞的抗一些病癥反應。2007年HValadi等進一步發(fā)現細胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質。隨著有關外泌體研究越來越多,研究者發(fā)現它普遍參與了機體免疫應答、抗原呈遞、細胞分化、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中。
外泌體在肺病治病中的作用:有研究表明,一些病癥來源的外泌體對一些病癥免疫的調控具有一定的影響作用,包括免疫壓制和免疫啟動兩個方面。Romagnoli等研究發(fā)現,肺病細胞可以刺激樹突狀細胞等抗原提呈細胞產生攜帶特異性的病抗原的外泌體,這些外泌體可以遷移到區(qū)域淋巴結,進而啟動CD4+T與CD8+T細胞產生抗一些病癥免疫反應,進而壓制一些病癥生長。Besse等研究發(fā)現,在晚期NSCLC患者中,裝載有IFN-γ,MHCI和MHCⅡ限制性的病抗原的樹突狀細胞外泌體增強了NK細胞的抗一些病癥免疫功能,研究證實外泌體參與相關一些病癥生理病理過程,在NSCLC免疫治病中有著重要的臨床應用價值,為NSCLC的治病打開了新的視野。主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。
研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性。與脂質體和其他合成藥物納米顆粒載體不同,外泌體含有可能增強內吞作用的跨膜和膜錨定蛋白,從而促進其內容物的遞送。CD47是外泌體蛋白質之一,是一個普遍表達的整合素相關跨膜蛋白,其部分功能可以保護細胞免受吞噬作用。CD47是信號調節(jié)蛋白α(SIRPα,也稱為CD172a)的配體,CD47-SIRPα間的結合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進胰腺病細胞增殖,增強胞飲作用從而促進一些病癥細胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細胞有一定毒性作用,但使用外泌體能夠較小化對細胞的毒性。研究人員發(fā)現,CD47和病基因KRAS驅動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,并增強胰腺病細胞對外泌體的特異性。所以,外泌體的這種特性增強了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。天津外泌體提取試劑廠家
使用PBS對膜進行洗脫即得到外泌體濃縮液。天津外泌體提取試劑廠家
外泌體項目獲批學科方向:從統(tǒng)計來看,與前年相似外泌體立項集中的領域還是一些病癥學,近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,耐藥性,檢測等方面有關。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現外泌體轉運p-STAT3可促進結直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細胞外囊泡相關的miRNA作為子宮內膜ai分子標志物的可能性。此外,在神經系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學及其他領域也有不少外泌體相關項目中標。天津外泌體提取試劑廠家
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