外泌體（Exosome）是細(xì)胞主動分泌的囊泡樣小體，大小均一，直徑30-200nm，密度1.10-1.18g/ml，來源普遍，幾乎所有細(xì)胞都可分泌，在血液，尿液，唾液，腦脊液，寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹，腹水，乳汁等體液中普遍分布，寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中。1996年，寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹，研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細(xì)胞依賴的抗一些病癥反應(yīng)，開啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎解答了細(xì)胞如何組織其內(nèi)部較重要的運輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘。無法實現(xiàn)臨床的常規(guī)化應(yīng)用。寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體的組成較為復(fù)雜，其內(nèi)含有多種生物大分子，如：核酸（雙鏈DNA和各種RNA亞型）、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。這些分子被外泌體攜帶進(jìn)入血液循環(huán)，而后被靶細(xì)胞吸收，從而調(diào)節(jié)靶細(xì)胞基因表達(dá)和細(xì)胞功能。此外，外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子，調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達(dá)，參與細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞信號的傳導(dǎo)。有研究表明，外泌體能影響一些病癥微環(huán)境的形成、增強(qiáng)一些病癥細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力、介導(dǎo)一些病癥免疫壓制及參與一些病癥放化療抵抗進(jìn)而促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展。寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。

研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性。與脂質(zhì)體和其他合成藥物納米顆粒載體不同，外泌體含有可能增強(qiáng)內(nèi)吞作用的跨膜和膜錨定蛋白，從而促進(jìn)其內(nèi)容物的遞送。CD47是外泌體蛋白質(zhì)之一，是一個普遍表達(dá)的整合素相關(guān)跨膜蛋白，其部分功能可以保護(hù)細(xì)胞免受吞噬作用。CD47是信號調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα，也稱為CD172a）的配體，CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號，從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖，增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細(xì)胞有一定毒性作用，但使用外泌體能夠較小化對細(xì)胞的毒性。研究人員發(fā)現(xiàn)，CD47和病基因KRAS驅(qū)動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理，并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對外泌體的特異性。所以，外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力，并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期。

外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯(lián)系緊密，研究思路可以分為三大類：表達(dá)譜、分子標(biāo)志物和分子機(jī)制方向，其中表達(dá)譜思路的特點就是短平快、通常以測序數(shù)據(jù)為主要內(nèi)容，短平快發(fā)表3-5分文章。而分子標(biāo)志物的特點是在表達(dá)譜基礎(chǔ)之上加入大量樣本驗證，建立ROC、KM曲線，分析分子與臨床疾病的相關(guān)性為主，通常文章影響因子在3-10分之間。分子機(jī)制研究，顧名思義要做到細(xì)胞功能、機(jī)制研究深度，因此工作量通常較大，影響因子通常能夠上10+。使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后。

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物，多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度快，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。lWesternblot分子標(biāo)志物檢測：外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；細(xì)胞質(zhì)蛋白，如肌動蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質(zhì)。寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒，組分經(jīng)過優(yōu)化處理，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標(biāo)志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進(jìn)行Westernblot檢測，可以鑒定所提的外泌體。寧波外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

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