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核酸的基本結(jié)構(gòu)單元是核苷酸,核苷酸含有含氮堿基、戊糖和磷酸3種組分。堿基與戊糖構(gòu)成核苷,核苷的磷酸酯為核苷酸。DNA和RNA中的戊糖不同,RNA中的戊糖是D-核糖;DNA不含核糖而含D-2-脫氧核糖(核糖中2位碳原子上的羥基為氫所取代)。核酸就是根據(jù)其中戊糖種類來(lái)分類的,DNA和RNA的堿基也有所不同。核酸的理化性質(zhì)RNA和核苷酸的純品都呈白色粉末或結(jié)晶,DNA則為白色類似石棉樣的纖維狀物。除肌苷酸、鳥(niǎo)苷酸具有鮮味外,核酸和核苷酸大都呈酸味。DNA、RNA和核苷酸都是極性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有機(jī)溶劑,它們的鈉鹽比游離核酸易溶于水,RNA鈉鹽在水中溶解度可達(dá)40g/L,DNA鈉鹽在水中為10g/L,呈黏性膠體溶液。在酸性溶液中,DNA、RNA易水解,在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定。天然狀態(tài)的DNA是以脫氧核糖白(DNP)形式存在于細(xì)胞核中。要從細(xì)胞中提取DNA時(shí),青島全血核酸提取直銷,先把DNP抽提出來(lái),再把P除去,再除去細(xì)胞中的糖,RNA及無(wú)機(jī)離子等,青島全血核酸提取直銷,青島全血核酸提取直銷,從中分離DNA。 核酸提取簡(jiǎn)化步驟,縮短提取時(shí)間。青島全血核酸提取直銷
核酸抽提原理:去污劑則是通過(guò)使蛋白質(zhì)變性,破壞膜結(jié)構(gòu)及解開(kāi)與核酸相連接的蛋白質(zhì),從而實(shí)現(xiàn)核酸游離在裂解體系中。裂解體系中還可能加入蛋白酶;利用蛋白酶將蛋白質(zhì)消化成小的片段,促進(jìn)核酸與蛋白質(zhì)的分開(kāi),同時(shí),也便于后面的純化操作以及獲得更純的核酸。也有直接使用高濃度的蛋白質(zhì)變性劑(如GIT、GuHCl等)裂解的,該方法已經(jīng)成為了RNA抽提的主流,卻不是基因組DNA抽提的主流。好常用的純化方法,一是PC抽提+醇沉淀,二是介質(zhì)純化。第一種方法是利用PC對(duì)裂解體系進(jìn)行反復(fù)抽提以去除蛋白質(zhì),實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)的分離;再用醇將核酸沉淀下來(lái),實(shí)現(xiàn)核酸與鹽的分離。青島全血核酸提取直銷核酸提取封閉提取倉(cāng),一次性耗材。
核酸的物理性質(zhì):①黏性:DNA的高軸比等性質(zhì)使得其水溶液具有高黏性,很長(zhǎng)的DNA分子又易于被機(jī)械力或超聲波損傷,同時(shí)黏度下降。② 浮力密度:可根據(jù)DNA的密度對(duì)其進(jìn)行純化和分析。在高濃度分子質(zhì)量的鹽溶液(CsCl)中,DNA具有與溶液大致相同的密度,將溶液高速離心,則CsCl趨于沉降于底部,從而建立密度梯度,而DNA較終沉降于其浮力密度相應(yīng)的位置,形成狹帶,這種技術(shù)成為平衡密度梯度離心或等密度梯度離心。③穩(wěn)定性:核酸的結(jié)構(gòu)相當(dāng)穩(wěn)定,其主要原因有1、堿基對(duì)間的氫鍵2、堿基的堆積作用3、環(huán)境中的陽(yáng)離子。
什么是核酸:由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,為生命的好基本物質(zhì)之一。核酸較廣存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞、微生物內(nèi)、生物體內(nèi)的核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合形成白。不同的核酸,其化學(xué)組成、核苷酸排列順序等不同。根據(jù)化學(xué)組成不同,核酸可分為核糖核酸(簡(jiǎn)稱RNA)和脫氧核糖核酸(簡(jiǎn)稱DNA)。DNA是儲(chǔ)存、復(fù)制和傳遞遺傳信息的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。提取核酸的方法及其優(yōu)缺點(diǎn):1.保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性。2.排除其它分子的污染。核酸提取應(yīng)注意的問(wèn)題:1.簡(jiǎn)化步驟,縮短提取時(shí)間2.減少化學(xué)因素對(duì)核酸的降解3.減少物理因素對(duì)核酸的降解:機(jī)械剪切力和高溫4.防止核酸的生物降解。核酸提取從而實(shí)現(xiàn)核酸游離在裂解體系中。
磁珠法核酸提取原理:依據(jù)與硅膠膜離心柱相同的原理,運(yùn)用納米技術(shù)對(duì)超順磁性納米顆粒的表面進(jìn)行改良和表面修飾后,制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。該磁珠能在微觀界面上與核酸分子特異性地識(shí)別和高效結(jié)合。利用氧化硅納米微球的超順磁性,在Chaotropic鹽(鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外加磁場(chǎng)的作用下,能從血液、動(dòng)物組織、食品、病原微生物等樣本中的DNA和RNA分離出來(lái),可應(yīng)用在臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。核酸提取儀可根據(jù)需求自定義裂解、洗脫溫度。青島全血核酸提取直銷
核酸提取儀單機(jī)操作節(jié)省更多的空間與能源。青島全血核酸提取直銷
核酸提取的其他方法: 胍鹽提取結(jié)合二氧化硅吸附法 二氧化硅具有特異吸附核酸的特性,異硫氰酸胍可使細(xì)胞裂解,因此在高濃度異硫氰酸胍存 在下,從細(xì)胞(包括細(xì)菌)或細(xì)菌顆粒中釋放出來(lái)的核酸成分可以結(jié)合在二氧化硅上,利用此 特性可提取血液和尿液中 DNA 和 RNA。 2.TRIzol 試劑提取 RNA 方法: TRIzol 試劑盒是由 GIBCO BRI 公司推出的產(chǎn)品,其操作方法簡(jiǎn)單方便,一小時(shí)內(nèi)即可完 成。 TRIzol 試劑裂解細(xì)胞, 用 再加入氯仿, 離心后可見(jiàn)三層, 上層為透明的水相含有 RNA, 中間層含 DNA,下層為紅色的有機(jī)相,含蛋白質(zhì)。 青島全血核酸提取直銷
文章來(lái)源地址: http://www.cdcfah.com/cp/2983813.html
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