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病理切片的制作需要取一定大小的病變組織,用病理組織學(xué)方法制成病理切片〔通常將病變組織包埋在石蠟塊里,用切片機(jī)切成薄片,再用蘇木精-伊紅(H-E)染色〕,用顯微鏡進(jìn)一步檢查病變。 病變的發(fā) 展過(guò)程,***作出病理診斷。 病理切片的制作 1.制作病理切片取材 (1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好,人體組織一般在離體后,動(dòng)物組織在處死后迅速固定,以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。 (2)組織塊的大小:所取組織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部,但根據(jù)制片材料和目的不同,組織塊的較理想體積也不同,如制作病理外檢、科研切片,江西病理切片總代理,其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可,這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間,若制作教學(xué)切片厚取0.3 ~0.5cm,這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。 (3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利,切割時(shí)不可來(lái)回銼動(dòng)。夾取組織時(shí)切勿過(guò)緊,以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形,江西病理切片總代理。 (4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材,江西病理切片總代理,病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同,根據(jù)要求規(guī)范化取材。
制作病理切片浸蠟、包埋 (1)使石蠟浸入組織中,取代組織中含有的透明劑。 (2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中,石蠟?zāi)毯?,組織即被包在其中,稱蠟塊,此過(guò)程稱為包埋。 5.制作病理切片切片和貼片 (1)修整蠟塊:可視其組織的大小,在組織邊緣約0.1~0.2cm處,切去余蠟部分,否則易造成組織皺縮不平。 (2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀 (3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。 (4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺(tái)上,把刀臺(tái)上的緊固螺絲旋緊,使切片時(shí)不產(chǎn)生振動(dòng),能保持一定的切片厚度。 (5)切片的厚度:切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意選擇其厚度,石蠟切片的厚度一般在4~6μm。 (6)切片 (7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上,借水的張力和水的溫度,將略皺的蠟帶自然展平。 (8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后,將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水,置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘,脫去溶化組織間隙的石蠟。
制作病理切片染色和封片 常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法,簡(jiǎn)稱H.E染色法。這種方法對(duì)任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色,如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料,可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色,如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。 H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固 常規(guī)蘇木素染色中的對(duì)比染色是用伊紅,近年來(lái)在英、美家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對(duì)比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。
文章來(lái)源地址: http://www.cdcfah.com/cp/329094.html
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