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詳細(xì)說明
制作病理切片浸蠟、包埋 (1)使石蠟浸入組織中,取代組織中含有的透明劑。 (2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中,石蠟?zāi)毯?,組織即被包在其中,稱蠟塊,此過程稱為包埋。 5.制作病理切片切片和貼片 (1)修整蠟塊:可視其組織的大小,在組織邊緣約0.1~0.2cm處,切去余蠟部分,否則易造成組織皺縮不平。 (2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀 (3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。 (4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺(tái)上,把刀臺(tái)上的緊固螺絲旋緊,四川病理切片廠家銷售,使切片時(shí)不產(chǎn)生振動(dòng),能保持一定的切片厚度,四川病理切片廠家銷售。 (5)切片的厚度:切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意選擇其厚度,石蠟切片的厚度一般在4~6μm。 (6)切片 (7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上,借水的張力和水的溫度,四川病理切片廠家銷售,將略皺的蠟帶自然展平。 (8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后,將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水,置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘,脫去溶化組織間隙的石蠟。
制作病理切片染色和封片 常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法,簡(jiǎn)稱H.E染色法。這種方法對(duì)任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色,如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料,可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色,如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。 H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固 常規(guī)蘇木素染色中的對(duì)比染色是用伊紅,近年來在英、美家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對(duì)比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。
制作病理切片脫水透明 標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后,組織中含有較多的水分,必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來,這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片,還是用火棉膠切片,都必須除去組織中所含水分,因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容,常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。 脫水的步驟是:80%、90%、95%各種濃度乙醇2小時(shí),此過程可用脫水機(jī)自控完成。 **也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑,但因其脫水能力很強(qiáng),對(duì)組織有劇烈收縮作用,在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、**等不溶于石蠟,還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/330200.html
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