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固定(1)小塊組織固定法:這是相當(dāng)常用的方法,從人體或動(dòng)物體取下的小塊組織,須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定,通常,標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20,但組織塊不宜過大過厚,否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm,廣東病理切片生產(chǎn)商。(2)注射、灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部,或需要對整個(gè)臟器或整個(gè)動(dòng)物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身,從而得到充分的固定,廣東病理切片生產(chǎn)商,廣東病理切片生產(chǎn)商。(3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本,可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。相當(dāng)常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
制作病理切片染色和封片 常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法,簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色,如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料,可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色,如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。 H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固 常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。
制作病理切片脫水透明 標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后,組織中含有較多的水分,必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來,這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片,還是用火棉膠切片,都必須除去組織中所含水分,因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容,常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。 脫水的步驟是:80%、90%、95%各種濃度乙醇2小時(shí),此過程可用脫水機(jī)自控完成。 **也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑,但因其脫水能力很強(qiáng),對組織有劇烈收縮作用,在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、**等不溶于石蠟,還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/331100.html
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