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試劑盒:JC-1是一種陽離子脂質(zhì)熒光染料,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-10染料是JC-1染料的升級,有著更很好的水溶性以及染料穩(wěn)定性。原理:JC-1染料在正常細(xì)胞內(nèi)聚集在線粒體內(nèi),上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報價,上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報價,形成多聚體,發(fā)紅色熒光;而在凋亡細(xì)胞內(nèi),由于線粒體膜電位的破壞,不能聚集到線粒體內(nèi),以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),在低濃度時以單體的形式存在,高濃度時以多聚體形式存在,兩者的發(fā)射光譜不同,但均可在流式細(xì)胞儀綠色(FL-1)通道檢測出綠色熒光,上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報價,JC-1可透過正常細(xì)胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi)。主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報價
GUS染色步驟:1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保溫1小時至過夜。 2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次,至陰性對照材料呈白色。 3.肉眼或顯微鏡下觀察,白色背景上的藍(lán)色小點即為GUS表達(dá)位點。注:用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。咨詢糖原染色試劑盒服務(wù)電話加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色。
粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1) 對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2) 對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3) 遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4) 溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片。
糖原D-PAS染色液:使用方法:1、兩張相同切片,二甲苯脫蠟,梯度乙醇入水。2、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h。另一張不用淀粉酶溶液處理,入水中1h作為對照。3、流水沖洗兩張切片各5~10min。4、入過碘酸溶液,室溫放置5~8min,一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入Schiff Reagent,置于室溫陰暗處浸染10~20min。7、自來水沖洗10min。8、入Mayer蘇木素染色液,染細(xì)胞核1~2min。9、(可選)酸性乙醇分化液分化2~5s。10、自來水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗使其返藍(lán)。11、二甲苯透明,中性樹膠封固。擁有日本進(jìn)口的各種染料,保證切片染色效果。
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:染色結(jié)果對比鮮明、結(jié)果易保存、陽性突出的染色方法;突出的陽性結(jié)果在于所選擇方法表達(dá)的色調(diào)及如何進(jìn)行背景的復(fù)染。結(jié)果能夠長時間保存、不褪色對于后續(xù)的調(diào)閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質(zhì),甲基紫染色法雖然流程較為簡單,但結(jié)果不易保存,陽性對比度相對不突出;剛果紅染色法陽性結(jié)果明顯,長時間保存不褪色,流程簡便,更是實用的方法。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,但結(jié)果對比度相對欠佳,與其他幾個染色法相比,多不選擇使用。常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行特殊染色。咨詢糖原染色試劑盒服務(wù)電話
對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報價
染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細(xì)胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時間,較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時觀察兩種不同的白血病細(xì)胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項染色。急性粒-單核細(xì)胞白血病 該染色法在急性粒-單核細(xì)胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應(yīng)的細(xì)胞,甚至少數(shù)病例在單個細(xì)胞內(nèi)同時出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應(yīng),因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細(xì)胞白血病的診斷上具有獨特價值。上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報價
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