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染色的原理和臨床意義:原理:粒細胞和單核細胞胞漿中含有的過氧化物酶(peroxidase,POX)能將底物過氧化氫分解,產(chǎn)生新生態(tài)氧,它將四甲基聯(lián)苯胺氧化為聯(lián)苯胺藍。聯(lián)苯胺藍自我脫氫氧化,顯棕色四甲基苯醌二胺,再加入亞硝基鐵**與聯(lián)苯胺藍結(jié)合,可形成穩(wěn)定的藍色顆粒,江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家,定位于細胞漿內(nèi)酶所在的部位。臨床意義: 臨床上主要用于急性白血病類型的鑒別:急性淋巴細胞白血病原,江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家、幼淋巴細胞POX染色均呈陰性反應(yīng);急性粒細胞白血病 原粒細胞POX染色呈局灶分布的陽性反應(yīng);急性早幼粒細胞白血病 顆粒增多的早幼粒細胞POX染色呈強陽性反應(yīng);急性單核細胞白血病原,江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家、幼單核細胞POX染色多呈細小顆粒弱陽性反應(yīng)。加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家
纖維染色:彈力纖維是結(jié)締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維,在創(chuàng)傷修復(fù)中一般在4—5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大,容易伸展,在結(jié)締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成,新鮮時呈黃色又稱黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng),折光性強,含量多時在HE染片上呈折光性強的粉紅色,量少的不顯色。故量多時與膠原纖維不易區(qū)別,量少則不能觀察。彈力纖維染色主要用于觀察彈力纖維有無增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進行特殊染色。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動到細胞一側(cè)的現(xiàn)象,多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團或沒有氣味,則不能用,配制時使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過對比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時氧化時間適當(dāng)縮短;如果染色時環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時間長,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此,室溫較高時可適當(dāng)縮短反應(yīng)時間。一般厚度不超過3mm,大小不超過5×5m㎡。
糖原染色(過碘酸-雪夫反應(yīng)) 原理 多糖中乙二醇基 經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合, 形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。 無紅色顆粒為陰性 _x000c_臨床意義 1、正常血細胞的染色反應(yīng) 粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含 量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。 淋巴細胞:糖原常凝聚成顆?;驂K狀。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆?;驁F塊。 正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別: 急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應(yīng),以彌 散性為主; 急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應(yīng)。切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家
待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應(yīng),染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,SO濃度高,染色時間適當(dāng)縮短;環(huán)境溫度高,染色時間也應(yīng)適當(dāng)縮短,反之則需適當(dāng)延長反應(yīng)時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。江西哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒推薦廠家
蘇州君欣生物科技有限公司總部位于江蘇省張家港市塘橋鎮(zhèn)東城科技創(chuàng)業(yè)園C幢二樓,是一家蘇州君欣生物科技有限公司的經(jīng)營范圍包括原代細胞的定制以及相關(guān)產(chǎn)品的配套銷售與服務(wù),干細胞染色體核型分析與鑒定、無血清細胞培養(yǎng)基以及無血清細胞凍存等系列產(chǎn)品的生產(chǎn)與銷售,動物疾病模型的構(gòu)建以及藥物效果的驗證等領(lǐng)域。的公司。蘇州君欣生物科技深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)?,為客戶提?**的原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養(yǎng)基,動物疾病模型。蘇州君欣生物科技致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。蘇州君欣生物科技始終關(guān)注精細化學(xué)品市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。
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