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糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1,江西品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話、 糖原的固定要及時(shí),而且標(biāo)本要新鮮。2,江西品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話、如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無(wú)水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛 10ml冰醋酸 5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過(guò)活性碳吸附漂白后不顯無(wú)色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,江西品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號(hào),其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意。組織石蠟切片的染色檢測(cè)。江西品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因 (β-glucuronidase),是從大腸桿菌K- 12 菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測(cè)出來(lái)。由于絕大多數(shù)植物沒(méi)有檢測(cè)到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個(gè)基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測(cè)所用的底物不同,可以選擇三種檢測(cè)方法:組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測(cè)法較高)。其中較為常用的是組織化學(xué)法。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒平均價(jià)格亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥。
糖元染色試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分普遍,主要包括。①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。②生物膜與細(xì)胞器的研究。③細(xì)胞骨架體系的研究。④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。⑧細(xì)胞工程。PAS染色,全稱過(guò)碘酸雪夫染色(Periodic Acid-Schiff Stain),主要用來(lái)顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測(cè)原理在于:過(guò)碘酸(也成為高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑。
糖原染色法:染色原理細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無(wú)色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過(guò)碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff 試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化。較大增強(qiáng)了染色效果;性能穩(wěn)定,特異性強(qiáng);操作簡(jiǎn)捷,*需1h左右。
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3 過(guò)碘酸溶液 0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 無(wú)色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。取材必須新鮮,這一點(diǎn)對(duì)于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要。北京提供糖原染色試劑盒哪家便宜
特殊染色是為了顯示與確定組織或細(xì)胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過(guò)程中出現(xiàn)的異常物質(zhì)。江西品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話
注意事項(xiàng):染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時(shí),較好一張玻片撈一個(gè)組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時(shí)也利于脫蠟(有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候,達(dá)不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時(shí),一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時(shí)間不能太少)以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時(shí)染色液未能充分與組織接觸,較終導(dǎo)致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過(guò)程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,以避免脫蠟時(shí)把標(biāo)簽紙也浸沒(méi),致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。江西品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話
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