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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:江蘇基因表達熒光定量PCR課題承包,熒光定量PCR
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一個評估 PCR 效率的關(guān)鍵參數(shù)是 R2,它是說明如何使用一個數(shù)值預測另一個數(shù)值的相關(guān)程度的統(tǒng)計學術(shù)語。如果 R2 為 1,那么 Y 值 (Ct) 可以用來準確預測 X 值(圖7A)。如果 R2 為 0,那么就不能通過 Y 值預測 X 值(圖 7B)。R2 值 >0.99 表示兩個數(shù)值之間相關(guān)的置信度良好。
精確度
標準差(偏差的平方根)是**常用的精確度計量方法。如果許多數(shù)據(jù)點都靠**均值,則標準差就?。蝗绻S多數(shù)據(jù)點都遠離平均值,則標準差就大。
實際上,足夠多重復次數(shù)產(chǎn)生的數(shù)據(jù)**形成大致的正態(tài)分布。這經(jīng)常可通過經(jīng)典的中心極限定理來證明,該定理稱大量**同分布隨機變量的和在無限多時趨向于正態(tài)分布。如圖 8A 所示,約 68% 的值在平均值的 1 個標準差之內(nèi),約 95% 的值在平均值的 2 個標準差之內(nèi),約 99.7% 的值在平均值的 3 個標準差之內(nèi)。 北京基因突變熒光定量PCR檢測服務
SNP基因分型技術(shù)原理是PCR擴增含有SNP的基因組片段,主要特點是準確性高、靈活性強、通量大,主要方法是TaqMan探針法。TaqMan探針法 針對染色體上的不同SNP位點分別設(shè)計PCR引物和TaqMan探針,進行實時熒光PCR擴增。探針的5’-端和3’-端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。當溶液中存在PCR產(chǎn)物時,該探針與模板退火,即產(chǎn)生了適合于核酸外切酶活性的底物,從而將探針5’-端連接的熒光分子從探針上切割下來,破壞兩熒光分子間的PRET,發(fā)出熒光。通常用于少量SNP位點分析。
熒光定量PCR技術(shù)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,通過熒光信號不斷累積而實現(xiàn)實時監(jiān)測PCR全程,然后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在實時熒光定量PCR中,對全程PCR擴增過程進行實時檢測,根據(jù)反應時間和熒光信號的變化可以繪制成一條曲線
Ct值:C**Cycle,t**threshold,Ct值的含義是每個反應管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)
熒光背景信號階段:在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號與背景無法區(qū)分,無法判斷產(chǎn)物量的變化
SYBR Green I法:SYBR Green I是一種具有綠色激發(fā)波長的染料,比較大吸收波長約為 497 nm,發(fā)射波長比較大約為 520 nm,可以和所有的 dsDNA 雙螺旋小溝區(qū)域結(jié)合。因為在游離狀態(tài)下 SYBR Green I 發(fā)出的熒光較弱,但是當它與雙鏈 DNA 結(jié)合后,熒光就會**增強,而且熒光信號的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步。此法的優(yōu)點是它可以監(jiān)測任何 dsDNA 序列的擴增,檢測方法較為簡單,成本較低,但也正是由于熒光染料能和任何dsDNA 結(jié)合,如非特異性擴增產(chǎn)物和引物二聚體也能與染料結(jié)合而產(chǎn)生熒光信號,使實驗產(chǎn)生假陽性結(jié)果,因此其特異性不如探針法。因為非特異性產(chǎn)物和引物二聚體的變性溫度要比目標產(chǎn)物的低,所以可以在熔解曲線反應過程中利用軟件分析儀器收集到信號進行鑒別北京基因表達熒光定量PCR實驗技術(shù)服務
江蘇基因表達熒光定量PCR課題承包
實時熒光定量PCR的應用
目前,qPCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應用于生物醫(yī)藥食品等行業(yè),應用于疾病的早期診斷、遺傳病的早期診斷、***研究、**的診斷與研究、食品病原微生物的檢測、轉(zhuǎn)基因食品檢測、動物疫病檢測等,除此之外,還包括:
● 基因擴增
● 擴增特異性分析
● 基因定量分析
● 基因檢測
● 基因分型
● SNP分析
● RFLP多態(tài)性分析
● 單/多基因表達研究
● 高通量基因表達譜研究
實時熒光定量PCR技術(shù),顧名思義,就是在PCR的基礎(chǔ)上加入熒光基團,通過熒光信號的變化的實時監(jiān)測PCR的反應過程,***通過對未知模板進行定量分析的方法。 江蘇基因表達熒光定量PCR課題承包
上海朝瑞生物科技有限公司創(chuàng)建于2003-01-22,注冊資金 700-1000萬元,辦公設(shè)施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,已全力實行網(wǎng)絡(luò)化辦公,**提高了速度和效率。在上海朝瑞科技近多年發(fā)展歷史,公司旗下現(xiàn)有品牌zrbiorise,SPRICELL,scienceladde等。公司堅持以客戶為中心、1.發(fā)布科研技術(shù) 2.發(fā)布應用技術(shù) 3.發(fā)布專業(yè)專長 4.發(fā)布科研成果 5.發(fā)布我的需求 6.發(fā)布篩選檢驗檢測服務 7.發(fā)布協(xié)同代研發(fā)服務 8.發(fā)布升級改造產(chǎn)品服務 9.發(fā)布實驗室及儀器設(shè)備共享 10.發(fā)布培訓基地共享 11.發(fā)布工廠代加工及共享車間 12.發(fā)布科研/項目團隊招聘13.發(fā)布研究生婚戀 14.發(fā)布項目整包服務 15.發(fā)布資源交換業(yè)務市場為導向,重信譽,保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準則。公司致力于打造***的科研技術(shù)服務,應用技術(shù)服務,科研成果轉(zhuǎn)化,科學產(chǎn)品銷售。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/1038859.html
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