實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 分析優(yōu)化過程確實(shí)需要時(shí)間，但是所花的時(shí)間是值得的。這樣得出的分析結(jié)果不僅具有比較高的靈敏度和比較大的動(dòng)態(tài)范圍，而且準(zhǔn)確度高、效率高、重復(fù)性好，為實(shí)驗(yàn)提供可靠的數(shù)據(jù)，天津熒光定量PCR分析服務(wù)。

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擁有近10年的科研技術(shù)服務(wù)經(jīng)歷，天津熒光定量PCR分析服務(wù)，在生物技術(shù)服務(wù)方面有著多年的經(jīng)驗(yàn)積累和技術(shù)保障，天津熒光定量PCR分析服務(wù)，訂購實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)，還同時(shí)可享受**RNA提取(限動(dòng)物組織樣本)、**逆轉(zhuǎn)錄及**的引物設(shè)計(jì)合成、**內(nèi)參檢測等超值服務(wù)

使用包含 3 種不同濃度的 ROX 染料的預(yù)混液對 TGF-β 進(jìn)行擴(kuò)增。顯示 (A) Ct 值和 (B) 標(biāo)準(zhǔn)差隨 ROX 染料濃度的變化。降低 ROX 染料濃度導(dǎo)致 Ct 出現(xiàn)得更早，但是會(huì)增大標(biāo)準(zhǔn)差。使用 Applied Biosystems 7500 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 系統(tǒng)執(zhí)行所有擴(kuò)增。

Ct 隨 PCR 效率發(fā)生變化。藍(lán)色標(biāo)準(zhǔn)曲線的效率為 **（斜率為 –3.3）。綠色標(biāo)準(zhǔn)曲線的效率為 78%（斜率為 –4）。與高效率條件相比（藍(lán)色），在低效率條件下（綠色），擴(kuò)增量 Y 使 Ct 出現(xiàn)得更早。較低擴(kuò)增量 (X) 時(shí)則情況相反，與高效率條件（藍(lán)色）相比，低效率條件（綠色）使 Ct 出現(xiàn)得更晚。

有關(guān)轉(zhuǎn)基因及其產(chǎn)品的安全性的爭論在國內(nèi)外愈演愈烈，各國**紛紛出臺(tái)一系列的政策、法規(guī)，要求對轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行標(biāo)識，有些國家對轉(zhuǎn)基因的比較低含量做了限定，其閾值大小從1-5％不等。這就要求必須對轉(zhuǎn)基因及其產(chǎn)品進(jìn)行檢測。 常規(guī)的檢測方法多采用PCR法，如PCR-凝膠電泳、PCR-ELISA等。這些方法普遍存在著PCR產(chǎn)物污染、特異性不高及速度慢等問題。熒光PCR技術(shù)是一種新近發(fā)展起來的檢測技術(shù)，它的應(yīng)用將從根本上解決這些問題。 1.收集了國內(nèi)外商品化的轉(zhuǎn)基因作物品種，并通過查閱有關(guān)文獻(xiàn)及網(wǎng)站初步確定了各種作物的轉(zhuǎn)基因構(gòu)建圖； 2．于反應(yīng)體系中引入U(xiǎn)NG去污染酶，建立了無污染熒光PCR擴(kuò)增體系； 3．以植物內(nèi)源基因18SrRNA為靶標(biāo)，設(shè)計(jì)了特異性引物和熒光探針，建立了以18SrRNA基因的擴(kuò)增與否來判斷核酸提取質(zhì)量好壞的方法； 4．以FAM熒光素為標(biāo)記，建立了以35S、NOS、NPTⅡ、Pat、Bar、FMV和CryⅢa為篩選目標(biāo)的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物熒光PCR定性檢測體系； 5．分別以FAM和TET兩種熒光素標(biāo)記外源基因和內(nèi)源基因，建立了轉(zhuǎn)基因大豆及轉(zhuǎn)基因玉米的熒光定量PCR檢測體系。

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