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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:上海9分鐘完成RNA提取試劑盒500T/5865元,RNA提取試劑盒
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詳細(xì)說(shuō)明
用于各種植物、動(dòng)物、微生物的RNA提取,在每個(gè)試劑盒里都有一份說(shuō)明使用說(shuō)明書(shū)。實(shí)驗(yàn)者只需要按照說(shuō)明書(shū)上的步驟操作即可。使用時(shí)無(wú)需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學(xué)后實(shí)驗(yàn)。但較好的試劑盒價(jià)格比較貴,在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來(lái)定奪試劑盒的使用。
一般包括:成分?jǐn)?shù)量?jī)?chǔ)藏溫度有效期裂解液100ml2-8℃一年漂洗液30mlRT一年洗柱液100mlRT一年RNasefreeddH2O30mlRT一年RNasefree吸附柱100個(gè)RT一年RNasefree收集管(2ml)100個(gè)RT一年此外,還配有一份試劑盒使用說(shuō)明書(shū),根據(jù)不同的生產(chǎn)商,可能還配有不同的試劑,上海9分鐘完成RNA提取試劑盒500T/5865元,如:DNA酶、溶菌酶等。 也是壓在國(guó)內(nèi)企業(yè)和患者身上的三座大山,上海9分鐘完成RNA提取試劑盒500T/5865元,導(dǎo)致國(guó)內(nèi)基因檢測(cè)企業(yè)運(yùn)轉(zhuǎn)效率低,上海9分鐘完成RNA提取試劑盒500T/5865元、盈利難、競(jìng)爭(zhēng)激烈。上海9分鐘完成RNA提取試劑盒500T/5865元
RNA提取注意事項(xiàng)(3)
破壁方法
細(xì)胞或組織的徹底勻漿對(duì)RNA提取來(lái)說(shuō),是一個(gè)很關(guān)鍵的步驟,它能夠防止RNA的損失和降解。勻漿的方法應(yīng)根據(jù)細(xì)胞或組織的類型來(lái)選擇。大部分培養(yǎng)的細(xì)胞可以置于細(xì)胞裂解液中,通過(guò)簡(jiǎn)單的渦旋震蕩來(lái)勻漿;而動(dòng)物組織、植物組織、酵母和細(xì)菌、真核細(xì)菌則常常需要更加劇烈的方法,通常用液氮研磨。比如說(shuō)細(xì)菌(特別是革蘭氏陽(yáng)性菌)的細(xì)胞壁,就需要溶菌酶消化來(lái)實(shí)現(xiàn)徹底的細(xì)胞裂解和RNA的比較大回收。酵母和革蘭氏陽(yáng)性菌通常還需要液氮研磨過(guò)程中加入玻璃微珠幫助破壁,酵母提取也可以加入諸如Lyticase等破壁酶幫助破壁,再用TRIpure或RNApure進(jìn)行提取。
上海操作簡(jiǎn)單RNA提取試劑盒QQ 804036498將處理后的樣品在室溫放置5分鐘,使得核酸蛋白復(fù)合物完全分離。
意:此步驟目的是將純化柱中殘余的漂洗液去除,離心后將純化柱在室溫放置片刻,或置于超凈工作臺(tái)上通風(fēng)片刻,以充分晾干。如果有漂洗液殘留,可能會(huì)影響后續(xù)的RT等實(shí)驗(yàn)操作。
將純化柱轉(zhuǎn)入一個(gè)新的離心管中,加30–100 μl RNase-free ddH2O,室溫放置2 min,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)離心2 min。
洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30 μl,體積過(guò)小影響回收效率。且RNA應(yīng)保存在-70℃,以防降解。
注意:如果想提高RNA得率,可重復(fù)上步操作一次,合并兩次得到的溶液。
緩慢加入0.5 倍體積無(wú)水乙醇,混勻(此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)沉淀)。將得到溶液和沉淀一起轉(zhuǎn)入純化柱中,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)離心30 s,若一次不能將全部溶液和混合物加入純化柱,請(qǐng)分兩次轉(zhuǎn)入純化柱中,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)離心30 s,棄掉收集管中的廢液。
向純化柱中加入500 μl 溶液 RPI(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入乙醇),4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)離心30 s,棄廢液。
向純化柱中加入500 μl 溶液 RW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入乙醇),室溫靜置2 min,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)離心30 s,棄廢液。
向純化柱 中加入500 μl 溶液 RW,室溫靜置2 分鐘,4℃ 12,000 rpm(~13,400×g)離心30 s,去除殘余液體。
將純化柱入2ml 收集管中,4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)離心2 min,去除殘余液體。 芯片和試劑,對(duì)操作人員技術(shù)要求低,全程只需20分鐘,患者等待周期短,成本低。
RNA提取注意事項(xiàng)(1):
迅速滅活內(nèi)源的RNA酶,以防止RNA降解。 以下3個(gè)方法均可有效使內(nèi)源RNA酶失活: 1)用含離液(如胍鹽)的細(xì)胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。 2)用液氮瞬間凍結(jié)樣品。值得特別注意的是:組織塊必須保證足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結(jié),以確保瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無(wú)液氮RNA樣品儲(chǔ)存液中。它是一種水相、的收集試劑,能立即穩(wěn)定并保護(hù)完整、未凍結(jié)的組織和細(xì)胞樣品中的RNA。關(guān)鍵要點(diǎn)是組織樣品切片一定要夠?。?0.5 cm),這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速滲入組織塊中。 但較好的試劑盒價(jià)格比較貴,在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來(lái)定奪試劑盒的使用。上海操作簡(jiǎn)單RNA提取試劑盒QQ 804036498
RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測(cè)。上海9分鐘完成RNA提取試劑盒500T/5865元
動(dòng)物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
貼壁細(xì)胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細(xì)胞,每106細(xì)胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。
細(xì)胞懸液:離心收集細(xì)胞。每106動(dòng)物、植物和酵母細(xì)胞或每107細(xì)菌細(xì)胞加1ml裂解液混勻。
血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細(xì)胞裂解液,混勻后室溫放置10分鐘,10000rpm離心1分鐘。棄上清,若沉淀含有紅細(xì)胞,可加入2倍體積紅細(xì)胞裂解液重復(fù)裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml裂解液混勻。
將處理后的樣品在室溫放置5分鐘,使得核酸蛋白復(fù)合物完全分離。 上海9分鐘完成RNA提取試劑盒500T/5865元
上海朝瑞生物科技有限公司創(chuàng)建于2003-01-22,注冊(cè)資金 700-1000萬(wàn)元,辦公設(shè)施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,已全面實(shí)行網(wǎng)絡(luò)化辦公,大大提高了速度和效率。致力于創(chuàng)造高品質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù),以誠(chéng)信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨,以建zrbiorise,SPRICELL,scienceladde名牌產(chǎn)品為目標(biāo),努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司不僅僅提供專業(yè)的1.發(fā)布科研技術(shù) 2.發(fā)布應(yīng)用技術(shù) 3.發(fā)布專業(yè)專長(zhǎng) 4.發(fā)布科研成果 5.發(fā)布我的需求 6.發(fā)布篩選檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù) 7.發(fā)布協(xié)同代研發(fā)服務(wù) 8.發(fā)布升級(jí)改造產(chǎn)品服務(wù) 9.發(fā)布實(shí)驗(yàn)室及儀器設(shè)備共享 10.發(fā)布培訓(xùn)基地共享 11.發(fā)布工廠代加工及共享車間 12.發(fā)布科研/項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)招聘13.發(fā)布研究生婚戀 14.發(fā)布項(xiàng)目整包服務(wù) 15.發(fā)布資源交換業(yè)務(wù),同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。上海朝瑞生物科技有限公司主營(yíng)業(yè)務(wù)涵蓋[ "科研技術(shù)服務(wù)", "應(yīng)用技術(shù)服務(wù)", "科研成果轉(zhuǎn)化", "科學(xué)產(chǎn)品銷售" ],堅(jiān)持“質(zhì)量第一、優(yōu)質(zhì)服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。
文章來(lái)源地址: http://www.cdcfah.com/cp/273046.html
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