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免疫組織化學(xué)是一項在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)與臨床科研中被廣泛應(yīng)用的一項技術(shù),江蘇多靶點免疫組化分析服務(wù),免疫組化染色服務(wù)也是生物公司的一項常規(guī)服務(wù)之一。該技術(shù)融合了抗原和抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)技術(shù)與組織學(xué)技術(shù),江蘇多靶點免疫組化分析服務(wù),通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色,來對組織或細(xì)胞內(nèi)抗原進行定位和定量研究。肽類、***、神經(jīng)遞質(zhì)、細(xì)胞因子、受體、表面抗原等,它們的組織細(xì)胞內(nèi)具有抗原性的物質(zhì),所以均可以用免疫組織化學(xué)方法顯示。免疫組化常用的顯色劑包括熒光素、酶、生物素和鐵蛋白等。11、金屬離子和金屬蛋白復(fù)合物
金屬離子和金屬蛋白復(fù)合物如鐵蛋白、金和汞可以作為免疫組化反應(yīng)中的標(biāo)記物。如鐵蛋白等,主要應(yīng)用于免疫電鏡。免疫金銀法的基本原理是用特異性抗體與抗原反應(yīng),隨后用金標(biāo)記的間接抗體或SPA蛋白,再與特異性抗體結(jié)合,用乳酸銀處理,江蘇多靶點免疫組化分析服務(wù),使銀顆粒沉積在金顆粒上,還原銀反應(yīng)而顯示出黑褐色。適用于石蠟切片、冰凍切片,培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞涂片和樹脂包埋的電鏡切片。這種方法敏感性高,可檢測組織中微量抗原,定位準(zhǔn)確、無擴散現(xiàn)象且背景清洗,對比度好、方法簡便。 江蘇多靶點免疫組化分析服務(wù)
是一種小分子維生素,分子量為244,是轉(zhuǎn)氨甲?;^程中的輔酶?!た股锼?avidin),又稱卵白素或親和素,是一種分子量為67000的堿性蛋白,對生物素具有很強的親和力,比抗原抗體間的親和力要高出100萬倍。它由4個亞基組成,每個亞基都有生物素的結(jié)合位點。·兩者均可與抗體等大分子生物活性物質(zhì)相偶聯(lián),又可被酶類等多種示蹤物所標(biāo)記,形成生物素-抗生物素系統(tǒng)。–該系統(tǒng)一端偶聯(lián)大分子生物反應(yīng)體系,另一端連結(jié)標(biāo)記物,后者加入酶的底物,產(chǎn)生顏色反應(yīng)。(1)標(biāo)記抗生物素—生物素法(labelledavidin-biotinmethod,LAB):分為直接法和間接法?!ぶ苯臃ㄓ蒙锼貥?biāo)記***抗體,與抗原結(jié)合;酶標(biāo)記抗生物素,與生物素結(jié)合,然后進行酶呈色反應(yīng)?!らg接法用生物素標(biāo)記二抗,酶標(biāo)記抗生物素,先用***抗體與組織抗原結(jié)合,再將第二抗體與***抗體相連結(jié),***進行呈色反應(yīng)。(2)橋抗生物素一生物素法(bridgeavidin-biotinmethod,BRAB)–此法是用生物素分別標(biāo)記抗體和酶,以抗生物素為橋,把二者連接起來,進行呈色反應(yīng)。(3)抗生物素-生物素-過氧化物酶法(ABC法)·ABC法是在BRAB和LAB的基礎(chǔ)上改良的方法?!BC復(fù)合物是將過氧化物酶結(jié)合在生物素上。江蘇多靶點免疫組化技術(shù)服務(wù)
2. 免疫酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)是目前免疫組織化學(xué)研究中**常用的技術(shù).基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進行定位或定性研究.3. 免疫膠體金技術(shù)就是用膠體金標(biāo)記一抗,二抗或其他的能特異性的結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記的定位研究.
收藏查看我的收藏0有用+1已投票0免疫組織化學(xué)技術(shù)編輯鎖定免疫組織化學(xué)技術(shù)又稱為免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù),是指用標(biāo)記的特異性抗原或抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體的免疫反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對相應(yīng)的抗原或抗體進行定性、定位、定量測定的一項免疫學(xué)檢測方法。中文名免疫組織化學(xué)技術(shù)外文名Immunohistochemistrytechnique目錄1發(fā)展簡史2現(xiàn)狀與展望免疫組織化學(xué)技術(shù)發(fā)展簡史編輯免疫熒光組織化學(xué)是現(xiàn)***物學(xué)和醫(yī)學(xué)中廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一,是由Coons和他的同事(1941)建立,免疫熒光技術(shù)與形態(tài)學(xué)技術(shù)相結(jié)合發(fā)展成免疫熒光細(xì)胞(或組織)化學(xué)。它與葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素與卵白素、植物血凝素(ConA等)相結(jié)合拓寬了領(lǐng)域;與激光技術(shù)、電子計算機,掃描電視和雙光子顯微鏡等技術(shù)結(jié)合發(fā)展為定量免疫熒光組織化學(xué)技術(shù);熒光***細(xì)胞分類器Fluorescinactivatedcellsorter(FACS)的應(yīng)用,激光共聚焦顯微鏡的問世,使免疫熒光細(xì)胞技術(shù)發(fā)展到更高的階段,開創(chuàng)了免疫熒光技術(shù)的新領(lǐng)域。細(xì)胞顯微分光光度計與圖像分析儀的結(jié)合使免疫熒光組織化學(xué)的定量檢測更加準(zhǔn)確。
這方面我有慘痛教訓(xùn),當(dāng)時我買的抗體稀釋液偏酸,結(jié)果背景一片黃(未見特異性染色),建議pH在。(中性及弱堿性條件(pH7-8)有利于免疫復(fù)合物的形成,而酸性條件則有利于分解;低離子強度有利于免疫復(fù)合物的形成,而高離子強度則有利于分解)9)拍照有條件的話比較好立即拍照,若不能及時拍照,也要封好片和用指甲油封固,保持避光和濕度。使用熒光顯微鏡注意嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變程序;應(yīng)在暗室中進行檢查;防止紫外線對眼睛的損害,在調(diào)整光源時應(yīng)戴上防護眼鏡;檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱或褪色;激發(fā)光長時間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象;所以**多不得超過2~3h;熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時間,保護光源。天熱時,應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再啟用時,須待燈光充分冷卻后才能點燃。***中應(yīng)避免數(shù)次點燃光源。關(guān)閉汞燈至少在開啟15-30分鐘后;標(biāo)本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā)。江蘇多靶點免疫組化技術(shù)服務(wù)
江蘇多靶點免疫組化分析服務(wù)
因而它是大多數(shù)免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法。1、取材的特殊要求及注意事項·標(biāo)本新鮮:一般在2h以內(nèi)進行,超過2h,組織將有不同程度的自溶,其抗原或變性消失,或嚴(yán)重彌散?!と〔牟课唬撼〔≡罨蚝龣z抗原部位外,還應(yīng)取病灶與正常交界處,即所取組織切片中同時應(yīng)有抗原陽性和陰性區(qū),以形成自身對照。–細(xì)胞壞死后,不僅抗原彌散或消失,而且常引起非特異著色,干擾觀察,因此取材時應(yīng)盡可能避開壞死區(qū)。1、取材的特殊要求及注意事項(續(xù))·避免擠壓:取材時組織受擠壓可使邊緣部細(xì)胞形態(tài)改變并加深非特異著色,因而取材時應(yīng)使用鋒利的刀刃;–鑷取組織動作要輕;–經(jīng)窺鏡直接鉗取的組織往往有過度擠壓,觀察結(jié)果時應(yīng)有所考慮。2、固定及常用的固定液·取材后的組織需立刻投于固定劑中–固定使組織和細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài);–對免疫組化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或彌散?!こS霉潭ㄒ海汗潭▌┢贩N很多,但大多屬于醛類和醇類。其固定原理不同,各有優(yōu)缺點。–醛類(常用甲醛、戊二醛和多聚甲醛)–醇類(常用乙醇)–其它(**)(1)醛類·甲醛。江蘇多靶點免疫組化分析服務(wù)
上海朝瑞生物科技有限公司創(chuàng)建于2003-01-22,注冊資金 700-1000萬元,辦公設(shè)施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,已***實行網(wǎng)絡(luò)化辦公,**提高了速度和效率。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展zrbiorise,SPRICELL,scienceladde的品牌。公司以用心服務(wù)為**價值,希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力,將1.發(fā)布科研技術(shù) 2.發(fā)布應(yīng)用技術(shù) 3.發(fā)布專業(yè)專長 4.發(fā)布科研成果 5.發(fā)布我的需求 6.發(fā)布篩選檢驗檢測服務(wù) 7.發(fā)布協(xié)同代研發(fā)服務(wù) 8.發(fā)布升級改造產(chǎn)品服務(wù) 9.發(fā)布實驗室及儀器設(shè)備共享 10.發(fā)布培訓(xùn)基地共享 11.發(fā)布工廠代加工及共享車間 12.發(fā)布科研/項目團隊招聘13.發(fā)布研究生婚戀 14.發(fā)布項目整包服務(wù) 15.發(fā)布資源交換業(yè)務(wù)等業(yè)務(wù)進行到底。自公司成立以來,一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽求發(fā)展”的經(jīng)營理念,始終堅持以客戶的需求和滿意為**,為客戶提供質(zhì)量的[ "科研技術(shù)服務(wù)", "應(yīng)用技術(shù)服務(wù)", "科研成果轉(zhuǎn)化", "科學(xué)產(chǎn)品銷售" ],從而使公司不斷發(fā)展壯大。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/278022.html
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