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產品關鍵詞:天津標準數字PCR檢測服務,數字PCR
***更新:2020-06-17 10:16:59
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整合“非靶向代謝組“***性”和靶向代謝組“準確性”檢測技術優(yōu)點的新型代謝組檢測技術,具有高通量、超靈敏、廣覆蓋、定性定量準等特點,千標自建MWDB數據庫,可實現在生物樣本中一次性定性定量檢測600余種代謝物。
樣本要求:1,天津標準數字PCR檢測服務. 血清、血漿:200ul/sample;液氮速凍-80℃保存,干冰寄送;應盡量避免溶血。 2. 尿液:500 ul /sample;液氮速凍后-80℃保存,干冰寄送。 3. 組織:200mg/sample;液氮速凍后-80℃保存,干冰寄送,天津標準數字PCR檢測服務。 4. 細胞:≥1×107/sample;液氮速凍后-80℃保存,干冰寄送。 5. 腦脊液:200 ul /sample;液氮速凍后-80℃保存,干冰寄送。 6. 糞便及腸道內容物:500mg/sample;液氮速凍后-80℃保存,干冰寄送,天津標準數字PCR檢測服務。 其他樣本類型請咨詢相關工作人員。需注意:避免反復凍融 這兩個方向的主要區(qū)別個人認為是生物技術更偏重于科研,生物工程更加偏向于生產。天津標準數字PCR檢測服務
疾病預防控制中心、出入境檢驗檢疫局系統(tǒng)的實驗室可以將基于TaqMan探針法的定量PCR體系無縫地轉移到數字PCR上,從而滿足該類實驗室對于檢測結果的要求:靈敏度更高、重復性更好、無需依賴標準曲線的精確定量結果,同時操作簡便, 數字PCR技術因起高精密度、耐受能力強、高靈敏度等優(yōu)點,逐漸被用于病原微生物載量分析的相關研究。如HIV抗逆轉錄病原微生物醫(yī)療過程中病原微生物殘留量的監(jiān)控;HBV耐藥突變的檢測;HCV的分子分型;抗甲氧西林金黃色葡萄球菌的院內監(jiān)控;環(huán)境微生物不同功能基因之間的連鎖分析等等。 合肥高靈敏數字PCR服務當前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來定量。
數字PCR是一種核酸分子***定量技術。是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下,DNA聚合酶依賴的酶促合成反應,擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。相較于qPCR,BIOG數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的***定量。
數字PCR即Digital PCR(dPCR),它是是一種核酸分子***定量技術。相較于qPCR,數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的***定量。PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下,DNA聚合酶依賴的酶促合成反應,擴增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結合。
定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域:拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。
數字PCR技術不斷發(fā)展,Bio-Rad、LIFE Technologies及RainDance等廠家相繼推出技術較為成熟的數字PCR產品。QuantaLife公司開發(fā)出的微滴數字PCR技術。該產品還獲得了2011年度Frost & Sullivan北美新產品創(chuàng)新獎。2011年10月,Bio-Rad公司收購了QuantaLife和ddPCR技術,相繼推出了QX100、QX200微滴式數字PCR系統(tǒng)。 他們的獨特優(yōu)勢是能夠產生非常均一、重復的1納升液滴。
目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法,在均相溶液中,當擴增引物增加時,由于擴增引物之間的相互作用,從而影響擴增的效率;數字PCR將其分散到大量微液滴中擴增,將可**降低引物間相互作用,提高擴增效率。同時還可以實現對于少量模板的有效擴增,得到更多的有效測序數據,可用于二代測序輔助建庫。CRISPR-Cas9技術的發(fā)明,是基因編輯技術的一大突破,但如何驗證實驗是否成功,仍需要高靈敏度的檢測方法,數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發(fā)明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測,但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。所以數字PCR可用于CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證 以改良物種質量和生命大分子特性或生產特殊用途的生命大分子物質等。上海低靶點拷貝數字PCR
生物技術和生物工程沒有實質性的差別,都是屬于應用科學。天津標準數字PCR檢測服務
數字PCR通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應單元(微滴),包含一個或多個拷貝的核酸分子(也就是說我們所說的 DNA 模板) ,這是與PCR或qPCR反應比較大的區(qū)別,PCR或qPCR只在一個反應體系中進行,而數字PCR在每個反應單元(微滴)中都會對目標分子進行擴增,擴增結束后統(tǒng)計熒光信號并分析。是不是聽起來特別高(yi)大(lian)上(meng)?舉個栗子,PCR或qPCR檢測突變像是在大海里撈一個會發(fā)光的針,周圍都是海水,很難看到針的光在哪,而dPCR就像把海水盛到好多個碗里面,瞧一眼很容易就知道哪個碗在發(fā)光了,而且,系統(tǒng)還會數出來到底有多少個碗里是發(fā)光的,多少個碗里是沒發(fā)光的,這樣一比,不就很容易的知道有多少數量的突變,就能做到***定量了。天津標準數字PCR檢測服務
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