–缺點(diǎn)：對(duì)封閉牢固的抗原決定簇暴露不理想。(3)微波照射法·將玻片放入裝有抗原修復(fù)液的容器中，置微波爐加熱至95℃以上，持續(xù)l0～15分鐘，冷卻后，按免疫組化染色步驟進(jìn)行?！ご朔椒ㄓ捎谖⒉▓?chǎng)內(nèi)極性分子、離子高速運(yùn)動(dòng)，撞擊交聯(lián)的網(wǎng)鏈，使抗原異常的構(gòu)想恢復(fù)正常，且因分子運(yùn)動(dòng)產(chǎn)熱、效率高、時(shí)間短，對(duì)抗原再現(xiàn)效果好。(4)高壓加熱法暴露抗原·將玻片浸入抗原修復(fù)液內(nèi)，置高壓鍋中高壓2～3min，可取得極好的效果。·由于高壓下受熱均勻，特別使用于大批量標(biāo)本的染色。(1)酸水解法·酸水解可使交聯(lián)斷裂、暴露抗原。·將玻片浸入1mol/LHCl溶液中，室溫作用20min(溫度升高，作用時(shí)間縮短)。·此法能增強(qiáng)特異性染色，降低背景，但需注意水解過(guò)度將破壞抗原性及形態(tài)結(jié)構(gòu)。加熱法的注意事項(xiàng)·達(dá)到規(guī)定的溫度(92～95?C以上)；·維持一定的時(shí)間；·避免切片干涸(抗原可能完全丟失)；·加熱后必須經(jīng)過(guò)室溫自然冷卻20～30分鐘，使未折疊的蛋白分子鏈恢復(fù)天然構(gòu)型；·修復(fù)液：–**常用的是；–***研究表明堿性修復(fù)液更有效，推薦使用1mM的EDTA緩沖液()。4，天津六色免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)、載玻片的處理·抗原修復(fù)過(guò)程中，由于高溫、高壓等諸多固素的影響，天津六色免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)，極易造成脫片，天津六色免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)。為防預(yù)防脫發(fā)片，常用粘附劑處理載玻片。

實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類，前者包括石蠟切片（病理切片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用、**基本的方法，對(duì)于組織形態(tài)保存好，且能作連續(xù)切片，有利于各種染色對(duì)照觀察；還能長(zhǎng)期存檔，供回顧性研究；石蠟切片制作過(guò)程對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進(jìn)行抗原修復(fù)，是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法?？贵w免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體，單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后，從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清，是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。

    使許多疑難**得到了明確診斷。在常規(guī)**病理診斷中，5%-10%的病例單靠。尤其是免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí)，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：⑴惡性**的診斷與鑒別診斷；⑵確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位；⑶對(duì)某類**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型；⑷軟組織**的***一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類，因其種類多、組織形態(tài)相像，有時(shí)難以區(qū)分其組織來(lái)源，應(yīng)用多種標(biāo)志進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織**的診斷是不可缺少的；⑸發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶，有助于臨床***方案的確定，包括手術(shù)范圍的確定。⑹為臨床提供***方案的選擇。免疫組化免疫組化鏡檢在鏡檢前可以通過(guò)相關(guān)資料查詢抗體的表達(dá)部位：細(xì)胞間質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞漿、核膜、細(xì)胞核以及在其中的多個(gè)部位表達(dá)（如：MPO抗體表達(dá)在細(xì)胞膜、細(xì)胞漿、核膜、細(xì)胞核上）和表達(dá)組織（如：VWF抗體在血管壁上表達(dá)，呈現(xiàn)環(huán)形）。在顯微鏡下觀察時(shí)，先在4倍鏡下查找組織及其范圍，然后查看整個(gè)組織確定陽(yáng)性產(chǎn)物的表達(dá)部位，然后將陽(yáng)性產(chǎn)物表達(dá)部位置于視野正**，換高倍鏡觀察。

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