需求數(shù)量:0
價格要求:面議
所在地:上海市
包裝要求:
產(chǎn)品關鍵詞:北京水體基因組熒光定量PCR分析服務
***更新:2020-06-18 07:22:31
瀏覽次數(shù):0次
聯(lián)系我們
當前位置:首頁?產(chǎn)品供應?農(nóng)業(yè)?農(nóng)林牧漁項目合作?北京水體基因組熒光定量PCR分析服務 來電咨詢 上海朝瑞生物科技供應
需求數(shù)量:0
價格要求:面議
所在地:上海市
包裝要求:
產(chǎn)品關鍵詞:北京水體基因組熒光定量PCR分析服務
***更新:2020-06-18 07:22:31
瀏覽次數(shù):0次
聯(lián)系我們聯(lián)系人:仲先生
郵箱: scienceladder@163.com
電話: 18621867065
傳真: 021_
網(wǎng)址:
手機: 021-54133071
地址: 上海市松江區(qū)廣富林路697號昂立大廈2113室
[當前離線] [加為商友] [發(fā)送信件]
詳細說明
PCR 反應的效率也會影響 Ct 值。在低效率條件下進行連續(xù)稀釋擴增,與高效率條件下相比,可能會產(chǎn)生斜率不同的標準曲線。在圖 5 中,兩個樣品(X 和 Y)分別在低效率和高效率條件下擴增,在靶濃度相同的條件下得到了不同的 Ct 值。在此示例中,盡管高效率條件(圖 5 中的藍色曲線)在高濃度時產(chǎn)生的 Ct 值更晚,但它在靶濃度低時卻更為靈敏。PCR 效率取決于實驗、預混液性能和樣品質(zhì)量。通常情況下,反應效率在 90-110% 之間都是可以接受的。另一方面,假定所有其他因素如儀器、試劑和實驗完全相同, 該效率也有助于得出***個樣品的模板量更少的結論。然而,如果產(chǎn)生兩個 Ct值使用的是不同的儀器、試劑、引物和探針或反應體積,北京水體基因組熒光定量PCR分析服務,北京水體基因組熒光定量PCR分析服務,該結論就不成立,北京水體基因組熒光定量PCR分析服務。因此,只有在使用上文定義的相同反應條件來比較實驗時,Ct ***值的比較才有意義。
使用可高壓處理的移液器,由于移液器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標本 DNA 的污染,因此要使用可高壓處理的移液器 。嚴格按照試驗的分區(qū)進行操作,按照提取區(qū)、擴增區(qū)、檢測區(qū)單方向流動,物品、樣品和試劑不可逆向流動 。操作多份樣品時,制備反應混合液,先將熒光 PCR 反應液、熒光探針和酶混合好,然后分裝到每個 PCR 管中,這樣即可以減少操作次數(shù),避免污染,又可以增加反應的精確度 。加樣品、加蛋白酶 K 和加樣品過程中,特別注意防止樣品的交叉污染和酶的降解 。操作時設立陰性及陽性對照,可驗證熒光 PCR反應的準確性和可信性
在PCR擴增時加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸:5’端標記一個報告熒光基團,3’端標記一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。
在熒光擴增曲線上人為設定的一個值,它可以設定在熒光信號**擴增階段任意位置上,但一般熒光閾值的設置是PCR反應**-15個循環(huán)熒光信號標準偏差的10倍。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/298845.html
本企業(yè)其它產(chǎn)品 更多>>