深度測序技術(shù)之所以稱為深度測序（deep sequencing），DNA高通量測序原理，是因為它是對傳統(tǒng)測序技術(shù)的一次**性改變，它通過一次性對幾十萬到幾百萬條DNA 分子進(jìn)行序列測定（之前只是幾十至多幾千個堿基），同時，DNA高通量測序原理，如此的高通量測序使得對一個物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全方面的分析成為可能。你以為深度測序只是一種“養(yǎng)”在實驗室“深閨”中摸不著、看不透的高精尖技術(shù)？錯，DNA高通量測序原理！錯！錯！深度測序技術(shù)的巨大發(fā)展，與計算機(jī)的發(fā)展歷程有著類似之處，它將對人類的科學(xué)、經(jīng)濟(jì)和社會三個方面產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。探普生物對病毒的全基因組進(jìn)行測序是基于探普的專有流程，樣本要求非常低，不要求粒子純化。DNA高通量測序原理

為什么發(fā)現(xiàn)病例的要盡快對病毒進(jìn)行全基因組測序呢？通過對病毒全基因組高通量測序可以在較短時間內(nèi)獲取病毒的全部基因信息，解釋病毒的來源、傳播、變異演化等科學(xué)問題，為后續(xù)流行病學(xué)調(diào)查指明方向，為相關(guān)病例的追蹤溯源提供重要依據(jù)，目前對溯源分型主要檢測手段就是高通量測序技術(shù)。高通量測序技術(shù)如何進(jìn)行病毒溯源？先對獲得的早期病例標(biāo)本開展全基因組高通量序列測定，通過與本地流行病毒及全球其他地區(qū)測定過序列的病毒比較，如果該病例傳染的病毒在基因組上和北美流行株更接近，比如在全長接近3萬個堿基的序列上，兩者*相差幾個堿基，相似度為99%以上，這就是為我們推斷該病例攜帶病毒為北美流行株提供依據(jù)。DNA病毒全序列測序排行全基因組預(yù)測的意義揭示了人類生、老、病和死的奧秘。

高通量測序技術(shù)又稱“下一代“測序技術(shù)或深度測序技術(shù)，可以一次性對幾十萬至幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定?，F(xiàn)已普遍應(yīng)用在基因組測序、基因表達(dá)分析、非編碼小分子RNA鑒定、轉(zhuǎn)錄因子靶基因篩選及DNA甲基化等相關(guān)的研究領(lǐng)域。高通量測序技術(shù)是對傳統(tǒng)測序一次**性的改變，一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定，因此在有些文獻(xiàn)中稱其為下一代測序技術(shù)(next generation sequencing)足見其劃時代的改變，同時高通量測序使得對一個物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌的分析成為可能，所以又被稱為深度測序(deep sequencing)。

目前深度測序數(shù)據(jù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域數(shù)量增加快、應(yīng)用廣的數(shù)據(jù)，對這些數(shù)據(jù)的管理、分析和應(yīng)用給生物信息學(xué)帶來了巨大的挑戰(zhàn)。早期的測序技術(shù)是“測定沒有計算快”，下一代測序技術(shù)發(fā)展以來，變?yōu)槿缃竦摹坝嬎銢]有測定快”。深度測序數(shù)據(jù)的迅猛增長使得數(shù)據(jù)科學(xué)分析方面的人才十分缺乏，深度測序和大數(shù)據(jù)處理都是新生事物，將深度測序數(shù)據(jù)應(yīng)用到臨床更需要數(shù)學(xué)統(tǒng)計、計算機(jī)和生物、臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的多學(xué)科交叉的高級人才。測序深度是測序量除以基因組長度,例如測序深度10*就相當(dāng)于測了10次的全基因組。在探普生物進(jìn)行病毒基因組測序非常簡單。

在哪些應(yīng)用場景需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序？在探普生物長時間運行過程中，我們接觸到的對病毒的全基因組進(jìn)行測序項目有比較豐富的應(yīng)用場景。先，從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因，搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費，同時能達(dá)到研究目的。此外，有的單位需要對傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究，如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組，可能需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序以后，結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)，達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。對病毒全基因組進(jìn)行測序，利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因組序列。DNA病毒全序列測序排行

使用Ion Torrent二代測序儀進(jìn)行病毒全基因組測定。DNA高通量測序原理

二代測序應(yīng)用的患者類型及時機(jī)的推薦：共識明確指出了二代測序應(yīng)用的患者類型及使用的時機(jī)的意見:對于神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染/血流傳染/呼吸道傳染患者，3天是二代測序使用的時機(jī)，在傳統(tǒng)方法(常規(guī)的生化檢查和培養(yǎng))3天未報陽性且經(jīng)驗性調(diào)整無效時，強(qiáng)烈推薦二代測序檢測；對疑似病毒傳染患者，包括：疑似神經(jīng)系統(tǒng)病毒傳染和病毒性肺炎且病情持續(xù)進(jìn)展的患者，若完善傳統(tǒng)PCR檢測后依然未獲得明確的病原學(xué)證據(jù)時，強(qiáng)烈推薦二代測序檢測。對于疑似局灶性傳染患者完成常規(guī)的生物化學(xué)、培養(yǎng)或PCR檢測后，若未能獲取病原學(xué)診斷結(jié)果，推薦將二代測序作為檢測方法。而對于懷疑繼發(fā)性血流傳染患者：在原發(fā)傳染灶的病原學(xué)檢測為陰性或因各種因素?zé)o法送檢合適標(biāo)本的情況下，可考慮將血標(biāo)本的二代測序檢測作為二線檢測。DNA高通量測序原理

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