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所在地:上海市
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產品關鍵詞:天津四步9分鐘完成RNA提取試劑盒****
***更新:2020-06-23 19:24:36
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詳細說明
本產品中含有苯酚,具0性和腐蝕性。如果吸入體內、接觸皮膚、吞食等會引起中毒、灼傷及其他身體傷害。使用時應穿戴防護服裝、手套、面罩等防護物。如果不小心接觸到眼睛時,天津四步9分鐘完成RNA提取試劑盒****,天津四步9分鐘完成RNA提取試劑盒****,應立即用大量水沖洗然后前往醫(yī)院進行***。
請穿實驗服并佩戴一次性手套進行實驗操作,避免 RNase 污染。
使用 RNase-free 的塑料制品和***頭避免交叉污染;所有離心管及相關溶液都必須無 RNA 酶污染。
請自備氯仿、異丙醇(新開封或提取 RNA **)、75%乙醇(DEPC 處理水配制)、DEPC 和 DEPC 處理水。
使用凍存的細胞或組織抽提總 RNA 的效果通常會比新鮮的細胞或組織差一些,因為凍存過程中細胞或組織內的 RNase 會釋放出來并剪切樣品。推薦:如果不能及時抽提 RNA,天津四步9分鐘完成RNA提取試劑盒****,先加入適量 Trizol 試劑,裂解樣品然后再凍存,這樣 RNase 就不會降解樣品。
蛋白和多糖污染可能的原因如下:
樣品中蛋白和多糖含量高,建議加入氯仿之前先高速離心去除蛋白和多糖。
吸取上層無色水相時不小心吸入一些中間蛋白層的物質,建議將移液***頭中的液體放回分層的離心管中,重新進行離心后再小心吸取上層水相即可。
樣品量太大,裂解不完全也會導致 RNA 樣品中蛋白和多糖污染。
A260/A280 的比值低于 1.65
可能的原因如下:1、RNA 樣品溶于 TE 溶液,低離子濃度和低 pH 條件下,A280 的數值會較高, 導致比值低。
樣品勻漿時加的 Trizol 試劑量太少。
勻漿后樣品未在室溫放置 5 分鐘,會導致蛋白的析出不完全,也會增加 A280的數值。
***得到的 RNA 沉淀溶解不完全。
樣品處理
組織:將組織在液氮中磨碎。每 50–100 mg 組織加1 ml 溶液 RL,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過裂解液RZ 體積的十分之一。
單層培養(yǎng)細胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液RZ 裂解細胞,每10 cm2 面積加1 ml溶液 RL。用取樣器抽打幾次。
注意:溶液 RL 的加入量根據培養(yǎng)瓶面積決定,不是由細胞數決定。如果加量不足,可能導致提取的RNA中有DNA污染。
細胞懸液:離心取細胞,棄上清。每5–10×106 動物細胞和植物細胞加入1 ml 溶液 RL。加溶液 RL 前不要洗滌細胞,以免降解mRNA。
將勻漿樣品在15–30℃放置5 min,使得核酸蛋白復合物完全分離。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/366125.html
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