實時熒光定量PCR的應(yīng)用

目前，北京轉(zhuǎn)基因熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，qPCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥食品等行業(yè)，應(yīng)用于疾病的早期診斷、遺傳病的早期診斷、***研究、**的診斷與研究、食品病原微生物的檢測、轉(zhuǎn)基因食品檢測、動物疫病檢測等，除此之外，北京轉(zhuǎn)基因熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，還包括：

● 基因擴增

● 擴增特異性分析

● 基因定量分析

● 基因檢測

● 基因分型

● SNP分析

● RFLP多態(tài)性分析

● 單/多基因表達(dá)研究

● 高通量基因表達(dá)譜研究

實時熒光定量PCR技術(shù)，顧名思義，就是在PCR的基礎(chǔ)上加入熒光基團，北京轉(zhuǎn)基因熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，通過熒光信號的變化的實時監(jiān)測PCR的反應(yīng)過程，***通過對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

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SYBR Green I法：SYBR Green I是一種具有綠色激發(fā)波長的染料，比較大吸收波長約為 497 nm，發(fā)射波長比較大約為 520 nm，可以和所有的 dsDNA 雙螺旋小溝區(qū)域結(jié)合。因為在游離狀態(tài)下 SYBR Green I 發(fā)出的熒光較弱，但是當(dāng)它與雙鏈 DNA 結(jié)合后，熒光就會**增強，而且熒光信號的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步。此法的優(yōu)點是它可以監(jiān)測任何 dsDNA 序列的擴增，檢測方法較為簡單，成本較低，但也正是由于熒光染料能和任何dsDNA 結(jié)合，如非特異性擴增產(chǎn)物和引物二聚體也能與染料結(jié)合而產(chǎn)生熒光信號，使實驗產(chǎn)生假陽性結(jié)果，因此其特異性不如探針法。因為非特異性產(chǎn)物和引物二聚體的變性溫度要比目標(biāo)產(chǎn)物的低，所以可以在熔解曲線反應(yīng)過程中利用軟件分析儀器收集到信號進(jìn)行鑒別

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