在這項新的研究中，北京HPV法細胞永生化，這些研究人員以體外培養(yǎng)的基因組工程細胞為實驗對象研究了永生化過程，而且當皮膚細胞從痣進展為惡性黑色素瘤時，也追蹤了它們，結果提示著端粒酶在**中起著更為復雜的作用。

論文通信作者、加州大學伯克利分校分子與細胞生物學助理教授Dirk Hockemeyer說：“我們的研究結果對如何考慮促進**產生的**早過程和將端粒酶作為zhiliao靶點產生影響。這也意味著端粒生物學在**產生的早期階段發(fā)揮的作用已被極大地忽視。我們在黑色素瘤中的發(fā)現(xiàn)很可能也適合其他的**類型，這也就意味著人們會更加仔細地研究較早的端粒縮短作為一種**yizhi機制所發(fā)揮的作用。”

從痣到**

Hockemeyer、他在加州大學伯克利分校的同事們與加州大學舊金山分校皮膚病理學家Boris Bastian及其同事合作，北京HPV法細胞永生化，發(fā)現(xiàn)細胞永生化是一個兩步驟過程，北京HPV法細胞永生化，**初由jihuo端粒酶的突變引起，但這種jihuo水平較低。該突變位于端粒酶基因上游的一個啟動子（被稱作TERT），該啟動子調節(jié)著端粒酶的表達水平。四年前，已有人報道過，大約70％的惡性黑色素瘤在TERT啟動子中具有這種相同的突變。

    建株方法續(xù)4、棄上清液，再加6ml1640全培養(yǎng)液進行第二次洗滌，離心1500轉15分鐘。5、棄上清液，加入2ml1640全培養(yǎng)基（全培養(yǎng)基加入前，置37度水浴10分鐘），然后加入環(huán)胞霉素A（4%）和，充分混勻后移入到25平方厘米的培養(yǎng)瓶，置37度，5%CO2培養(yǎng)箱中。6、每2-3天加入3ml新鮮配制的培養(yǎng)基（1MHEPES緩沖液；15%胎牛血清（FBS）；1%青霉素和鏈霉素；PRMI1640補足到***）。7天左右鏡下觀察，可見淋巴細胞明顯增大，出現(xiàn)聚集現(xiàn)象。7、如果細胞增長慢，或細胞密度低，或培養(yǎng)液pH值呈酸性，吸出半量培養(yǎng)液，進行等量換液。8、當總量達到14ml時轉移到75ml培養(yǎng)瓶中，每2-3周加入5-10ml新鮮培養(yǎng)基。9、約6-8周，當總量達到45ml時，置50ml離心管中，離心1500轉，10分鐘。棄上清，加入3ml凍存培養(yǎng)基（5%二甲基亞楓(dimethylsufoxide)，95%FBS）混勻，成細胞懸浮液。凍存管分裝，1ml/管，立即置零下80度，1-2小時后移入液氮罐中。

    HSAS4，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006833大長舌菓蝠肺細胞；DBL1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006834恒河猴肺細胞；RM-L1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006835小鼠肺成纖維細胞；WML2，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006836小鼠胚胎細胞；BABL/C-E，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006837大長舌菓蝠肌肉細胞；DBM1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006838豚鼠肺細胞；GP-F1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006839豚鼠皮膚細胞；GP-S1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006840豚鼠皮膚細胞；GP-S2，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006841豚鼠心肌細胞；GP-H1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006842豚鼠皮膚細胞；GP-S3，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006843敘利亞倉鼠肌肉細胞；GH-M1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006844敘利亞倉鼠皮膚細胞；GH-S1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006845大鼠肺細胞；WTRL1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006846小耳豬肺細胞；SEP-L1，規(guī)格：>5×100000cells/瓶Cs-(004)-006847小耳豬肺細胞；SEP-L2，規(guī)格：>。

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