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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:天津DNA甲基化熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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SYBR Green I法:SYBR Green I是一種具有綠色激發(fā)波長(zhǎng)的染料,比較大吸收波長(zhǎng)約為 497 nm,發(fā)射波長(zhǎng)比較大約為 520 nm,可以和所有的 dsDNA 雙螺旋小溝區(qū)域結(jié)合。因?yàn)樵谟坞x狀態(tài)下 SYBR Green I 發(fā)出的熒光較弱,但是當(dāng)它與雙鏈 DNA 結(jié)合后,天津DNA甲基化熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),熒光就會(huì)**增強(qiáng),而且熒光信號(hào)的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步,天津DNA甲基化熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。此法的優(yōu)點(diǎn)是它可以監(jiān)測(cè)任何 dsDNA 序列的擴(kuò)增,檢測(cè)方法較為簡(jiǎn)單,成本較低,天津DNA甲基化熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),但也正是由于熒光染料能和任何dsDNA 結(jié)合,如非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物和引物二聚體也能與染料結(jié)合而產(chǎn)生熒光信號(hào),使實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果,因此其特異性不如探針?lè)?。因?yàn)榉翘禺愋援a(chǎn)物和引物二聚體的變性溫度要比目標(biāo)產(chǎn)物的低,所以可以在熔解曲線反應(yīng)過(guò)程中利用軟件分析儀器收集到信號(hào)進(jìn)行鑒別
轉(zhuǎn)基因:利用熒光定量PCR技術(shù)將轉(zhuǎn)基因信號(hào)擴(kuò)增放大。
在環(huán)境監(jiān)測(cè)方面的應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)已經(jīng)被國(guó)內(nèi)外應(yīng)用在環(huán)境監(jiān)測(cè)中,提高了監(jiān)測(cè)水平。此項(xiàng)技術(shù)可以檢測(cè)河流中環(huán)境微生物隨著季節(jié)變化的情況。還可以用來(lái)對(duì)地表水和飲用水中致病菌進(jìn)行檢測(cè)以便及時(shí)預(yù)告地表水污染情況以及采取相應(yīng)有效措施避免大范圍污染
儀器擺放:實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀應(yīng)安放在濕度較低、灰塵較少、遠(yuǎn)離水池的平穩(wěn)臺(tái)面上,不能有強(qiáng)光直射,室內(nèi)應(yīng)通風(fēng)良好,無(wú)腐蝕性氣體
熒光定量PCR技術(shù)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),通過(guò)熒光信號(hào)不斷累積而實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR全程,然后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。在實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,對(duì)全程PCR擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè),根據(jù)反應(yīng)時(shí)間和熒光信號(hào)的變化可以繪制成一條曲線
Ct值:C**Cycle,t**threshold,Ct值的含義是每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)
熒光背景信號(hào)階段:在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)與背景無(wú)法區(qū)分,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化
文章來(lái)源地址: http://www.cdcfah.com/cp/387682.html
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