B細(xì)胞永生化是一個(gè)歷久彌新的研究課題,如何維持B細(xì)胞體外連續(xù)傳代增殖并表達(dá)抗體的特性,對(duì)于研制***和診斷用抗體類***和制品具有重要的意義。B細(xì)胞永生化的方法包括雜交瘤技術(shù),EB***或SV40***永生化以及遺傳修飾法。永生化B細(xì)胞能快速有效的產(chǎn)生單克隆抗體，江蘇HPV法細(xì)胞永生化技術(shù)服務(wù)，江蘇HPV法細(xì)胞永生化技術(shù)服務(wù)，江蘇HPV法細(xì)胞永生化技術(shù)服務(wù),這種抗體能克服異源抗體產(chǎn)生的免疫排斥,是制備單克隆抗體的理想來(lái)源,成為研制***性單抗的重要方法。本文主要概述了B細(xì)胞永生化方法的研究進(jìn)展與未來(lái)的發(fā)展方向,以供從事這方面研究的人員參考。

    這使得盡管端粒末端短，但它們?nèi)阅芾^續(xù)生長(zhǎng)。然而，Hockemeyer說(shuō)，端粒酶水平是邊緣的，導(dǎo)致存活的突變細(xì)胞中的一些未受保護(hù)的染色體末端，這可能導(dǎo)致突變和進(jìn)一步**形成。“在我們的論文之前，人們可以認(rèn)為，在TERT啟動(dòng)子中*獲得這一個(gè)突變就足以使細(xì)胞永生化，任何時(shí)候發(fā)生這種情況的時(shí)候，端粒縮短被取出，”霍克邁耶說(shuō)。“我們顯示TERT啟動(dòng)子突變不能立即足以阻止端?？s短?！比欢匀徊磺宄裁磳?dǎo)致端粒酶的**終上調(diào)使細(xì)胞永生化。Hockemeyer說(shuō)，它不可能是另一個(gè)突變，而是影響端粒酶基因表達(dá)的表觀遺傳變化，或轉(zhuǎn)錄因子或其他結(jié)合端粒酶基因上游啟動(dòng)子的調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)的變化?！叭欢?，我們有證據(jù)表明，第二步必須發(fā)生，第二步是由端粒起源于正在發(fā)生的端粒短缺，并且端?？赡芄δ苁д{(diào)并促使基因組不穩(wěn)定。”雖然大多數(shù)**似乎需要端粒酶變得不死，但只有約10％至20％的**已知在端粒酶基因上游的啟動(dòng)子中具有單核苷酸變化。然而，這些包括大約70％的黑素瘤和50％的所有肝和膀胱*。Hockemeyer說(shuō)，支持TERT啟動(dòng)子突變上調(diào)端粒酶的理論的證據(jù)一直是矛盾的：*細(xì)胞傾向于具有短端粒的染色體，但具有更高水平的端粒酶，其應(yīng)該產(chǎn)生更長(zhǎng)的端粒。根據(jù)新的理論。

    例如EB***(epstein-barrvirus,EBV)、猿猴***40(simianvirus40,SV40)和人**瘤***(humanpapillomavirus,HPV)。這些******其天然宿主細(xì)胞，能誘導(dǎo)細(xì)胞永生化。EBV能使B淋巴母細(xì)胞永生化形成淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞系，它是通過(guò)潛伏蛋白***細(xì)胞因子與其受體相互作用的途徑使細(xì)胞永生的。EBV永生化B細(xì)胞的一個(gè)*****的特點(diǎn)是端粒酶活性的提高，這可能是導(dǎo)致B細(xì)胞永生的主要原因。目前，EB***介導(dǎo)的細(xì)胞永生化應(yīng)用**多的是B淋巴細(xì)胞，其他細(xì)胞中的應(yīng)用很少。SV40是簡(jiǎn)單的真核細(xì)胞***，SV40的T抗原片段是**常用的目的片段，將其整合入靶細(xì)胞核內(nèi)并表達(dá)，可導(dǎo)致細(xì)胞增殖活力的改變并表現(xiàn)出多種與**相關(guān)的轉(zhuǎn)化顯型。應(yīng)用的方法包括：野生型SV40***共培養(yǎng)***靶細(xì)胞、磷酸鈣法、電穿孔以及逆轉(zhuǎn)錄***載體法等。HPV已成功將人的包皮細(xì)胞、角化上皮以及乳腺、胰導(dǎo)管和口腔等的上皮細(xì)胞永生化。HPV***的早期表達(dá)蛋白E6和E7在細(xì)胞永生化中起決定性作用。E6和E7蛋白能夠改變細(xì)胞的終末分化，誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)入S期，使細(xì)胞繞過(guò)正常細(xì)胞的周期檢查點(diǎn)。***法獲得的永生化細(xì)胞往往發(fā)生細(xì)胞表型改變，而且一般只應(yīng)用于***的特定宿主細(xì)胞。由于該法將整個(gè)***基因組導(dǎo)入了細(xì)胞，因此。

文章來(lái)源地址: http://www.cdcfah.com/cp/410332.html