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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元,RNA提取試劑盒
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詳細(xì)說明
按照每毫升**初的 Trizol 加入 1 ml 75%乙醇(DEPC 水配制)的比例,上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元,Vortex混勻或顛倒混勻,讓沉淀懸浮起來以充分洗滌沉淀中的鹽分。
9、4°C,12000rpm 離心 5 分鐘,棄上清。剩余的少量液體再用離心機(jī)瞬甩一下, 徹底去掉上清液。注意不要吸到沉淀,否則會造成 RNA 損失。
10、室溫放置空氣干燥 5-10 分鐘,上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元,待 RNA 沉淀略干后,加入適量(約 20-100μl)的 RNase-free 水溶解 RNA 沉淀,-80°C 凍存?!咀ⅰ壳形鹱?RNA 徹底干燥,上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元,否則將導(dǎo)致 RNA 溶解度降低。
也導(dǎo)致基因檢測無法普及至基層醫(yī)療地區(qū),甚至有的技術(shù)無法走出實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用于臨床。上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元
溶液 RL應(yīng)在2-8℃避光保存,其他溶液和純化柱室溫保存。
注意事項
● 嚴(yán)防操作環(huán)境、使用的容器、耗材和試劑的RNase污染。操作過程中勤換手套。
● 使用本產(chǎn)品提取的RNA一般不含有DNA污染。在極少數(shù)情況下(與組織pH值等相關(guān)),如果有DNA污染而又必須去除,則可以用RNase-free的DNase處理樣品。
● 請嚴(yán)格遵照操作步驟操作。
● 不同起始材料試劑用量及預(yù)期RNA產(chǎn)率。
***次使用前應(yīng)在溶液 RPI、溶液 RW中加入無水乙醇,加入量請參見瓶子上的標(biāo)簽。
北京新手RNA提取試劑盒***的選擇所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學(xué)后實(shí)驗(yàn)。
可選步驟: 4℃ 12,000 rpm (~13,400×g) 離心5分鐘,取上清,轉(zhuǎn)入一個新的無RNase 的離心管中。
注意:如果樣品中含有較多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物結(jié)節(jié)部分等,可加此步驟離心去除。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜、多糖、高分子量DNA,RNA存在于上清溶液中。
加入200 μl 氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15 s,室溫放置3 min。
4℃ 12,000 rpm (~13,400×g) 離心10 min,樣品會分成三層:黃色的有機(jī)相,中間層和無色的水相,RNA 主要在水相中,水相的體積約為所用溶液 RL試劑的60%。把水相轉(zhuǎn)移到新管中,進(jìn)行下一步操作。***次使用前應(yīng)在溶液 RPI、溶液 RW中加入無水乙醇,加入量請參見瓶上標(biāo)簽。
客戶提供: 1.需檢測的細(xì)胞或組織樣品,2.目的基因信息,3. 目的蛋白信息 4.WB一抗及抗體信息。**終交付:1.原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片 2. 詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報告(含實(shí)驗(yàn)步驟、試劑耗材等) 3.蛋白質(zhì)譜報告。
RNA/DNA pull-down是檢測RNA/DNA結(jié)合蛋白與其靶RNA/DNA之間相互作用的主要實(shí)驗(yàn)手段之一。用生物素標(biāo)記RNA/DNA 探針,與胞漿蛋白提取液孵育,形成RNA/DNA—蛋白質(zhì)復(fù)合物。該復(fù)合物可與鏈親和素標(biāo)記的磁珠結(jié)合從而與孵育液中的其他成分分離。復(fù)合物洗脫后,通過Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測特定的RNA/DNA結(jié)合蛋白是否與RNA/DNA相互作用,還可以對該蛋白進(jìn)行質(zhì)譜(MS)鑒定蛋白質(zhì)類型。 當(dāng)前提取效果好的是RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大。
細(xì)胞中的RNA主要有三類:rRNA約占80%-85%,tRNA和核內(nèi)小分子RNA約占10%-15%,mRNA約占1%-5%,由于rRNA占絕大多數(shù),因此我們用瓊脂糖凝膠電泳可以看到的即是rRNA,它也有三種類型:28S,18S,5S三條帶,在RNA的提取時,一定要注意RNase的污染,因RNA極易被RNase的降解,操作時應(yīng)盡量少說話,并在潔凈的環(huán)境中操作,主要防止手、唾液和空氣中Rnase的污染;另一方面使用的所有玻璃儀器、移液器、吸頭和離心管都用0.5%DEPC溶液處理過夜,然后高壓無菌15分鐘.但對于無菌的一次性使用的塑料制品基本上無RNase,,可以不經(jīng)處理直接用于提取RNA,實(shí)驗(yàn)室用的普通玻璃器皿和塑料制品經(jīng)常有Rnase污染,使用前必須180度干烤8小時或更長時間(玻璃器皿)或用氯仿沖洗(塑料制品),另外,由于材料不同,機(jī)體內(nèi)含有的糖、酚類物質(zhì)不一樣,因此材料不同用的方法也應(yīng)該不一樣。 當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好。上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元
使用時無需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元
RNA 降解可能的原因如下:
組織取出后沒有馬上進(jìn)行處理或冷凍,導(dǎo)致 RNase 的釋放降解樣品中的RNA。
貼壁細(xì)胞在胰蛋白酶處理時被破壞。
樣本量太大而加入的 Trizol 液少,導(dǎo)致裂解不完全,不能有效*** RNase的活性,進(jìn)而導(dǎo)致 RNA 降解。
提取過程中使用的溶液、離心管或***頭未經(jīng) RNase 去除處理。
RNA 沉淀沒有保存于-80°C。
RNA 電泳時的電泳液及電泳槽中含有 RNase,或者電泳時電泳液溫度過高, 造成 RNA 樣品被降解。
樣品中蛋白和多糖含量高,建議加入氯仿之前先高速離心去除蛋白和多糖。 上海9分鐘完成RNA提取試劑盒50T/690元
上海朝瑞生物科技有限公司創(chuàng)建于2003-01-22,注冊資金 700-1000萬元,辦公設(shè)施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,已***實(shí)行網(wǎng)絡(luò)化辦公,**提高了速度和效率。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),以誠信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨,以建zrbiorise,SPRICELL,scienceladde明星產(chǎn)品為目標(biāo),努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司不**提供專業(yè)的1.發(fā)布科研技術(shù) 2.發(fā)布應(yīng)用技術(shù) 3.發(fā)布專業(yè)專長 4.發(fā)布科研成果 5.發(fā)布我的需求 6.發(fā)布篩選檢驗(yàn)檢測服務(wù) 7.發(fā)布協(xié)同代研發(fā)服務(wù) 8.發(fā)布升級改造產(chǎn)品服務(wù) 9.發(fā)布實(shí)驗(yàn)室及儀器設(shè)備共享 10.發(fā)布培訓(xùn)基地共享 11.發(fā)布工廠代加工及共享車間 12.發(fā)布科研/項目團(tuán)隊招聘13.發(fā)布研究生婚戀 14.發(fā)布項目整包服務(wù) 15.發(fā)布資源交換業(yè)務(wù),同時還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù)。誠實(shí)、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的[ "科研技術(shù)服務(wù)", "應(yīng)用技術(shù)服務(wù)", "科研成果轉(zhuǎn)化", "科學(xué)產(chǎn)品銷售" ]。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/447577.html
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