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9、堿性磷酸酶堿性磷酸酶(AKP),又稱堿性磷酸單酯酶,是酶組織化學(xué)中**常用的酶之一。分布***,常見于活躍運(yùn)輸?shù)哪ど?。該酶在堿性環(huán)境下能催化各種醇和酚的磷酸酯水解,**適pH為,可被Mg2+、Mn2+和某些氨基酸所***;**物、碘液、砷酸鹽等可***其活性。顯示AKP的方法很多,主要有鈣鈷法和同時(shí)偶聯(lián)法。前者所需試劑便宜,江蘇五色免疫組化,容易購(gòu)買,操作簡(jiǎn)單,但會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。后者方法較靈敏,而且在正常組織內(nèi)不存在萘酚,因此不會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性,但所需試劑較難購(gòu)買。10、生物素(biotin)生物素是B族維生素之一。生物素在羧化,江蘇五色免疫組化、脫羧和轉(zhuǎn)羧化反應(yīng)中起輔酶作用。生物素是含硫水溶性維生素。廣布于動(dòng)物及植物組織,已從肝提取物和蛋黃中分離,是多種羧化酶輔基的成分。生物素標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少***抗體活性,生物素標(biāo)記的抗體可存放多年而不失活。能與生物素結(jié)合的二級(jí)試劑素,所需的各種標(biāo)記物均可購(gòu)置,江蘇五色免疫組化。此外,親和素和鏈霉親和素的結(jié)合背景水平非常低,結(jié)合緊密且快速,抗體很容易與經(jīng)過化學(xué)修飾的活化生物素結(jié)合。生物素又可以與結(jié)合有酶、熒光染料的親和素或鏈霉親和素連接,后者已有商品試劑供應(yīng)。這樣只需將純化抗體與生物素結(jié)合,就可用各種不同的標(biāo)記物來(lái)檢測(cè)。 江蘇五色免疫組化
2. 免疫酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)是目前免疫組織化學(xué)研究中**常用的技術(shù).基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進(jìn)行定位或定性研究.3. 免疫膠體金技術(shù)就是用膠體金標(biāo)記一抗,二抗或其他的能特異性的結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記的定位研究.江蘇五色免疫組化
–用戊二醛或碳化二亞胺作為交聯(lián)劑通過功能基團(tuán)-NH2、-COOH等將半抗原結(jié)合到載體上。結(jié)合比例為5kDa結(jié)合5~25個(gè)分子的小肽。免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)抗體(antibody,Ab)1、抗體的概念:免疫球蛋白·機(jī)體受到抗原刺激后,由漿細(xì)胞合成并分泌出一類具有與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白,被稱為抗體。–抗體主要存在于血清內(nèi);–抗體都是免疫球蛋白,但免疫球蛋白并不一定都是抗體。–免疫球蛋白根據(jù)重鏈的結(jié)構(gòu)及抗原特異性不同分為五種,既IgG、IgD、IgE、IgA、IgM。2、免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體:?jiǎn)慰寺】贵w和多克隆抗體。·單克隆抗體:是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,是應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備的。–特異性強(qiáng)、抗體產(chǎn)量高?!ざ嗫寺】贵w:是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。–特異性低,會(huì)產(chǎn)生抗體的交叉反應(yīng)。–多克隆抗體廣泛應(yīng)用于石蠟包埋組織切片,可減少假陰性染色機(jī)會(huì)。–抗原與抗體的結(jié)合,要求量保持一定比例,當(dāng)抗原或抗體過量時(shí),是不能聚合成大顆粒。3、抗體的制備——多克隆抗體的制備·動(dòng)物的選擇·佐劑(adjuvant)·免疫方法·免疫劑量·抗體效價(jià)的測(cè)定·放血或定期抽血。
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近年來(lái),隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難**得到了明確診斷。在常規(guī)**病理診斷中,5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面:⑴惡性**的診斷與鑒別診斷;⑵確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位;⑶對(duì)某類**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型;⑷軟組織**的zhiliao一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類,因其種類多、組織形態(tài)相像,有時(shí)難以區(qū)分其組織來(lái)源,應(yīng)用多種標(biāo)志進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織**的診斷是不可缺少的;⑸發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶,有助于臨床zhiliao方案的確定,包括手術(shù)范圍的確定。⑹為臨床提供zhiliao方案的選擇。江蘇五色免疫組化
江蘇五色免疫組化
TSA技術(shù)(Tyramide Signal Amplification?,酪胺信號(hào)放大技術(shù))是做多重免疫熒光染色的一種多快好省的方法,它使同一張片子上所有的靶標(biāo)都可以選用特異性高的兔單克隆抗體,搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn),而且信號(hào)放大的倍數(shù)**增強(qiáng)。如果想要運(yùn)用這個(gè)技術(shù),需要先做四個(gè)方面的準(zhǔn)備工作:嚴(yán)格驗(yàn)證的高特異性抗體:所有CST的IHC-P驗(yàn)證過的抗體都滿足mIHC(多重?zé)晒饷庖呓M化)高特異性的要求;HRP偶聯(lián)的針對(duì)一抗種屬亞型特異的二抗;酪胺熒光素(Perkin Elmer,Thermo Fisher Scientific等供應(yīng)商);多光譜成像系統(tǒng)(PerkinElmer等)。江蘇五色免疫組化
上海朝瑞生物科技有限公司成立于2003-01-22,注冊(cè)資本:700-1000萬(wàn)元。該公司服務(wù)型的公司。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè),以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、質(zhì)量高效的管理團(tuán)隊(duì)、精悍的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋[ "科研技術(shù)服務(wù)", "應(yīng)用技術(shù)服務(wù)", "科研成果轉(zhuǎn)化", "科學(xué)產(chǎn)品銷售" ],價(jià)格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。上海朝瑞科技以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標(biāo)的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。
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