需求數量:0
價格要求:面議
所在地:上海市
包裝要求:
產品關鍵詞:天津熒光定量PCR課題承包,熒光定量PCR
***更新:2020-08-14 10:08:10
瀏覽次數:0次
聯(lián)系我們
當前位置:首頁?產品供應?農業(yè)?農林牧漁項目合作?天津熒光定量PCR課題承包 **** 上海朝瑞生物科技供應
聯(lián)系人:仲先生
郵箱: scienceladder@163.com
電話: 18621867065
傳真: 021_
網址:
手機: 021-54133071
地址: 上海市松江區(qū)廣富林路697號昂立大廈2113室
[當前離線] [加為商友] [發(fā)送信件]
詳細說明
Scienceladder是讓知識、技術、專長、成果、資源流淌起來的平臺! Scienceladder是聚天下技術服務天下的平臺! Scienceladder是你的知識、技術、專長、成果實現價值轉化的平臺,天津熒光定量PCR課題承包! 發(fā)布你的技術、成果、專長,資源讓需求者得到幫助! 發(fā)布你的需求,讓供給者幫助你! 為科學做點事、為科學家做點事,天津熒光定量PCR課題承包、為技術推廣做點事!
歡迎來到上海朝瑞生物科技有限公司網站,天津熒光定量PCR課題承包,聯(lián)系人是仲先生。
主要經營科研技術服務|應用技術服務|科研成果轉化|科學產品銷售。
天津熒光定量PCR課題承包
熒光定量PCR 實驗步驟(1)
樣品RNA的抽提
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②每樣品加入1ml的TRIZOL試劑裂解,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用移液器反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 上海非編碼RNA 熒光定量PCR課題承包
實時熒光定量 PCR,又稱為定量 PCR 或 qPCR,可以為測定樣品中的靶標序列或基因數量提供簡單、簡潔的方法。該方法高度簡化,有時會忽略實現方法方面的關鍵因素,因此導致出現問題。本文將重點強調設置和評估實時熒光定量 PCR 反應時必須考慮的這些因素。
實時熒光定量PCR技術原理將熒光基團加入到PCR反應體系中,通過不斷累積熒光信號從而使對PCR全程的實時監(jiān)測實現,再根據標準曲線定量分析未知模板的方法,即是熒光定量PCR技術。在實時熒光定量PCR中,實時檢測全程PCR擴增過程,按照反應時間和熒光信號的變化能夠將一條曲線繪制成?;旌夏0錎NA和有熒光素的Taqman探針,遵守聚合酶鏈反應規(guī)律使高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環(huán)完成,切斷和模板DNA互補配對的Taqman探針,熒光素在反應體系中游離。熒光在特定光激發(fā)下發(fā)出,被擴增的目的基因片段隨著循環(huán)次數的增加呈級增長,Ct值根據實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度求取出來,同時對照多個已知模板濃度的標準品,就能夠使待測標本目的基因的拷貝數得出。
SNP基因分型技術原理是PCR擴增含有SNP的基因組片段,主要特點是準確性高、靈活性強、通量大,主要方法是TaqMan探針法。TaqMan探針法 針對染色體上的不同SNP位點分別設計PCR引物和TaqMan探針,進行實時熒光PCR擴增。探針的5’-端和3’-端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。當溶液中存在PCR產物時,該探針與模板退火,即產生了適合于核酸外切酶活性的底物,從而將探針5’-端連接的熒光分子從探針上切割下來,破壞兩熒光分子間的PRET,發(fā)出熒光。通常用于少量SNP位點分析。天津熒光定量PCR課題承包
天津熒光定量PCR課題承包
使用包含 3 種不同濃度的 ROX 染料的預混液對 TGF-β 進行擴增。顯示 (A) Ct 值和 (B) 標準差隨 ROX 染料濃度的變化。降低 ROX 染料濃度導致 Ct 出現得更早,但是會增大標準差。使用 Applied Biosystems 7500 實時熒光定量 PCR 系統(tǒng)執(zhí)行所有擴增。
Ct 隨 PCR 效率發(fā)生變化。藍色標準曲線的效率為 **(斜率為 –3.3)。綠色標準曲線的效率為 78%(斜率為 –4)。與高效率條件相比(藍色),在低效率條件下(綠色),擴增量 Y 使 Ct 出現得更早。較低擴增量 (X) 時則情況相反,與高效率條件(藍色)相比,低效率條件(綠色)使 Ct 出現得更晚。 天津熒光定量PCR課題承包
上海朝瑞生物科技有限公司成立于2003-01-22,注冊資本:700-1000萬元。該公司服務型的公司。公司是一家有限責任公司企業(yè),以誠信務實的創(chuàng)業(yè)精神、質量高效的管理團隊、精悍的職工隊伍,努力為廣大用戶提供***的產品。公司始終堅持客戶需求***的原則,致力于提供高質量的[ "科研技術服務", "應用技術服務", "科研成果轉化", "科學產品銷售" ]。上海朝瑞科技自成立以來,一直堅持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/911853.html
本企業(yè)其它產品 更多>>