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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),熒光定量PCR
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在PCR擴(kuò)增時(shí)加入一對引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸:5’端標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán),3’端標(biāo)記一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)。
在熒光擴(kuò)增曲線上人為設(shè)定的一個(gè)值,它可以設(shè)定在熒光信號(hào)**擴(kuò)增階段任意位置上,但一般熒光閾值的設(shè)置是PCR反應(yīng)**-15個(gè)循環(huán)熒光信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。 江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 分析優(yōu)化過程確實(shí)需要時(shí)間,但是所花的時(shí)間是值得的。這樣得出的分析結(jié)果不僅具有比較高的靈敏度和比較大的動(dòng)態(tài)范圍,而且準(zhǔn)確度高、效率高、重復(fù)性好,為實(shí)驗(yàn)提供可靠的數(shù)據(jù)。
如果你的科研時(shí)間有限,也可以選擇朝瑞實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測服務(wù),
擁有近10年的科研技術(shù)服務(wù)經(jīng)歷,在生物技術(shù)服務(wù)方面有著多年的經(jīng)驗(yàn)積累和技術(shù)保障,訂購實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù),還同時(shí)可享受**RNA提取(限動(dòng)物組織樣本)、**逆轉(zhuǎn)錄及**的引物設(shè)計(jì)合成、**內(nèi)參檢測等超值服務(wù)
天津基因表達(dá)熒光定量PCR檢測服務(wù)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-Time PCR)技術(shù)是在PCR技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的核酸定量技術(shù),它是通過在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),然后利用熒光信號(hào)的積累強(qiáng)弱實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知的DNA模板進(jìn)行定量,實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,為快速準(zhǔn)確地分析樣本中的各類待檢物質(zhì)提供了嶄新的技術(shù)工具,現(xiàn)在已被廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室及臨床**標(biāo)志物的檢測。Real-Time PCR與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比其使用了熒光探針標(biāo)記特定核酸從而提高了準(zhǔn)確性;靈敏度提高故使用較少的樣本量,從而減少了樣本消耗殆盡的風(fēng)險(xiǎn),在一小時(shí)左右即可出結(jié)果,簡化了傳統(tǒng)PCR方法;全封閉管分析、利用電腦分析軟件對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的檢測和自動(dòng)定量,定量動(dòng)態(tài)范圍高達(dá)五個(gè)數(shù)量級(jí),且結(jié)果重現(xiàn)性較好,這也提高了檢測的靈敏度和精密度。
所說的PCR應(yīng)該就是**常規(guī)的PCR,以DNA為模板,通過上下游引物,實(shí)現(xiàn)DNA的擴(kuò)增。
2、RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription),盡管有些資料上說實(shí)時(shí)熒光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也簡稱RT-PCR,但是這是不對的,不推薦。
基本操作過程是將所提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,然后將所獲得的cDNA作為模板,設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增,是一種檢測基因表達(dá)的常用方法。
3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR也就是Real-Time PCR,其比較大的作用是檢測樣品中的初始DNA濃度。
至于三者的關(guān)系,RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR應(yīng)該都屬于PCR,在RNA實(shí)驗(yàn)中,這二者都會(huì)應(yīng)用到
熒光信號(hào)**擴(kuò)增階段:只有在熒光產(chǎn)生進(jìn)入**期, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,所以在PCR反應(yīng)處于**期的某一點(diǎn)上來檢測PCR產(chǎn)物的量,由此來推斷模板**初的含量而進(jìn)行定量分析。研究表明,每個(gè)模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在線性關(guān)系,起始拷貝數(shù)越多,Ct值越小。通過已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可得到標(biāo)準(zhǔn)曲線,只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出該樣品的起始拷貝數(shù)
在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈**級(jí)的增加,所以反應(yīng)終產(chǎn)物量與起始模板量之間已經(jīng)不存在線性關(guān)系,通過反應(yīng)終產(chǎn)物也算不出起始DNA拷貝數(shù) 江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)
江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)
PCR檢測方法在臨床醫(yī)學(xué)及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中**有價(jià)值的應(yīng)用領(lǐng)域就是對***性疾病的診斷。理論上,只要樣本有一個(gè)病原體存在,PCR方法就可以檢測到。該方法對病原體的檢測解決了免疫學(xué)檢測的“窗口期”問題,常用于疾病的早期診斷,可判斷疾病是否處于隱性或亞臨床狀態(tài)。
大量的熒光定量PCR研究資料表明,病原體數(shù)量與***性疾病病情的輕重程度、傳染性及***效果均有相關(guān)性。因此,通過熒光定量PCR方法得到的檢測結(jié)果,一定程度上可以準(zhǔn)確反映疾病***的情況。 江蘇病原微生物熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)
上海朝瑞生物科技有限公司致力于化工,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求。公司自2003-01-22成立以來,投身于[ "科研技術(shù)服務(wù)", "應(yīng)用技術(shù)服務(wù)", "科研成果轉(zhuǎn)化", "科學(xué)產(chǎn)品銷售" ],是化工的主力軍。公司堅(jiān)持以技術(shù)創(chuàng)新為發(fā)展引擎,以客戶滿意為動(dòng)力,目前擁有5~10人專業(yè)人員,年?duì)I業(yè)額達(dá)到2000-3000萬元。上海朝瑞科技始終關(guān)注化工行業(yè)。海納百川,有容乃大,國內(nèi)外同行的智慧都是促使我們前行的力量。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/916883.html
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