定位準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快速、鮮明，在許多領(lǐng)域中仍占有不可取代的地位。如腎活檢、皮膚活檢中IgG、IgM、IgA、C3等檢測(cè)，自身抗體的檢測(cè)，傳染病的快速診斷，單克隆抗體的篩選及鑒定等。隨著科學(xué)技術(shù)地不斷發(fā)展，免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，放射出更加五彩繽紛的熒光。參考文獻(xiàn)（1）AkivoshiKawamura,.（2）王伯沄.免疫熒光組織化學(xué)和熒光組織化學(xué)技術(shù).第四軍醫(yī)大學(xué)科技資料增刊，北京多靶點(diǎn)免疫組化分析服務(wù),1974;2:5-30.（3）.（4）WickG,TraillKN,.（5）.（6）蔡文琴,王伯沄主編.實(shí)用免疫細(xì)胞化學(xué).成都：四川科技出版社1990，P968-977.（7）李成文.現(xiàn)代免疫化學(xué)技術(shù).上海:上?？萍汲霭嫔?992；P97-100.（8）Mahmudi-A3er-s,Lacy-P,Bablit2-B,(1-2):113-119.（9）Magro-C-M,(9):543-552.（10）(4):286-298.（11）GregoniWeber,(1):419-422.（12）SavigeJA,PaspaliansB,SilvestriniR,(ANCA)(18):568-571.（13）BallouB,FisherGW,DengJS,(3):251-257.（14）GruberHJ,HahnCD，北京多靶點(diǎn)免疫組化分析服務(wù),KadaG,(5):696-704.（15）SouthweelBR,(5):1140-1151.（16）ArsenievL,PickerdN,GoudevaL,(5):547-559，北京多靶點(diǎn)免疫組化分析服務(wù).（17）O'BrjenTE,MetheneyCD,(TIGR)proteinintrabecularmeshworkandschlemm'(6):517.（18）HuangMC。北京多靶點(diǎn)免疫組化分析服務(wù)

    6、Indo-1Indo-1是典型的雙發(fā)射熒光探針，無鈣時(shí)在485nm左右有發(fā)射峰，結(jié)合鈣后，則在405nm處有發(fā)射峰，兩者的比值與細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度成線性關(guān)系，將此比值與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比即可得出細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度，因此，可利用此探針定量檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度。7、量子點(diǎn)(quantumdot)量子點(diǎn)是近年來研制的一種新型熒光染料，又稱半導(dǎo)體納米晶體，是由幾百或幾千個(gè)納米級(jí)顆粒構(gòu)成的半導(dǎo)體材料，性質(zhì)穩(wěn)定，溶于水，細(xì)胞本身不能合成和組裝。量子點(diǎn)具有熒光時(shí)間長(zhǎng)、產(chǎn)生多種顏色、檢測(cè)方便和應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。8、辣根過氧化物酶辣根過氧化物酶是一種糖蛋白，由于在辣根中該酶的含量很高，故得名。它以鐵卟啉為輔基，在過氧化氫存在時(shí)能催化苯酚、苯胺及其取代物聚合。通常用做光學(xué)和電子顯微鏡的組織化學(xué)示蹤物。該酶比活性高，穩(wěn)定，分子量小，純酶容易制備，所以較為常用，不但可以用于免疫組化染色，也***運(yùn)用于免疫類（ELISA）試劑盒。過氧化物酶作為多個(gè)試劑盒顯色體系的關(guān)鍵成分，對(duì)試劑盒的質(zhì)量有重要影響。 上海六色免疫組化檢測(cè)服務(wù)

    在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測(cè)系統(tǒng)等。3）免疫膠體金技術(shù)免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白，對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此，用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位，甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。5、被檢測(cè)的物質(zhì)組織或細(xì)胞中凡是能作為抗原或半抗原，如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、***、核酸及病原體等都可用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。6、特點(diǎn)1）特異性強(qiáng)免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。2）敏感性高在應(yīng)用免疫組化的起始階段。

    我身邊有個(gè)研究生同學(xué)在我們實(shí)驗(yàn)室初次涉入免疫組化，聽說步驟不難，跟我后面做了幾次之后，就自己開始做了，連續(xù)做了三次，結(jié)果均是陰性染色。很掃興，不知是什么原因?qū)е碌?，后來我還是請(qǐng)教了上海舜田生物老師，她**提供給我我很大的幫助，解決問題的思路也逐步清晰。問題及其解答：免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些？1、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯(cuò)誤。不知抗體是進(jìn)口的還是國(guó)產(chǎn)的工作液，怎么這么高稀釋度也沒能做出陽(yáng)性結(jié)果？另外，不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng)，必須摸索比較好濃度。2、抗原修復(fù)不全，對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位，以利于與抗體結(jié)合；建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過實(shí)驗(yàn)，這是比較好的時(shí)間和次數(shù)。若不行，還可高壓修復(fù)。3、組織切片本身這種抗原含量低；4、血清封閉時(shí)間過長(zhǎng)。5、DAB孵育時(shí)間過短。6、細(xì)胞通透不全，抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng)。7、開始做免疫組化，我建議你一定要首先做個(gè)陽(yáng)性對(duì)照片，排除抗體等外的方法問題。我的實(shí)際解決方案：1、首先，排除組織切片內(nèi)的抗原有無丟失及其含量多少。免疫組化中兩個(gè)**重要的因素是抗原和抗體。

TSA技術(shù)(Tyramide Signal Amplification?，酪胺信號(hào)放大技術(shù))是做多重免疫熒光染色的一種多快好省的方法，它使同一張片子上所有的靶標(biāo)都可以選用特異性高的兔單克隆抗體，搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而且信號(hào)放大的倍數(shù)**增強(qiáng)。如果想要運(yùn)用這個(gè)技術(shù)，需要先做四個(gè)方面的準(zhǔn)備工作：嚴(yán)格驗(yàn)證的高特異性抗體：所有CST的IHC-P驗(yàn)證過的抗體都滿足mIHC(多重?zé)晒饷庖呓M化)高特異性的要求;HRP偶聯(lián)的針對(duì)一抗種屬亞型特異的二抗;酪胺熒光素(Perkin Elmer,Thermo Fisher Scientific等供應(yīng)商);多光譜成像系統(tǒng)(PerkinElmer等)。上海四色免疫組化檢測(cè)服務(wù)

北京多靶點(diǎn)免疫組化分析服務(wù)

    由于技術(shù)上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù)，那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍；現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn)，使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合，這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng)，使免疫組化方法越來越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。3）定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng)，可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位，因而可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察，這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究，對(duì)病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義的。7、從蛋白水平檢測(cè)角度，免疫組化技術(shù)與Westernblotting、ELISA的異同1）Westernblotting蛋白質(zhì)免疫印跡，也是利用抗體抗原反應(yīng)原理，結(jié)合化學(xué)發(fā)光等技術(shù)來檢查組織或細(xì)胞樣品內(nèi)蛋白含量的檢測(cè)方法。與免疫組化技術(shù)相比，定量可能更加準(zhǔn)確；當(dāng)然Westernblotting也可定性和定位（通過提取膜蛋白或**白、胞漿蛋白分別檢測(cè)其中抗原含量，進(jìn)而間接反映它們的定位），但敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于免疫組化技術(shù)。2）ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，也是利用抗體-抗原-抗原結(jié)合反應(yīng)原理來檢查體液或組織勻漿中蛋白含量的檢測(cè)。與免疫組化技術(shù)相比，定量**準(zhǔn)確。北京多靶點(diǎn)免疫組化分析服務(wù)

上海朝瑞生物科技有限公司位于上海市，注冊(cè)資本700-1000萬元，旗下?lián)碛?~10人***專業(yè)的員工。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù)，以誠(chéng)信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨，以建zrbiorise,SPRICELL,scienceladde明星產(chǎn)品為目標(biāo)，努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司不**提供專業(yè)的1.發(fā)布科研技術(shù) 2.發(fā)布應(yīng)用技術(shù) 3.發(fā)布專業(yè)專長(zhǎng) 4.發(fā)布科研成果 5.發(fā)布我的需求 6.發(fā)布篩選檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù) 7.發(fā)布協(xié)同代研發(fā)服務(wù) 8.發(fā)布升級(jí)改造產(chǎn)品服務(wù) 9.發(fā)布實(shí)驗(yàn)室及儀器設(shè)備共享 10.發(fā)布培訓(xùn)基地共享 11.發(fā)布工廠代加工及共享車間 12.發(fā)布科研/項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)招聘13.發(fā)布研究生婚戀 14.發(fā)布項(xiàng)目整包服務(wù) 15.發(fā)布資源交換業(yè)務(wù),同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù)。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求，也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的[ "科研技術(shù)服務(wù)", "應(yīng)用技術(shù)服務(wù)", "科研成果轉(zhuǎn)化", "科學(xué)產(chǎn)品銷售" ]。

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