意：此步驟目的是將純化柱中殘余的漂洗液去除，離心后將純化柱在室溫放置片刻，或置于超凈工作臺上通風(fēng)片刻，以充分晾干。如果有漂洗液殘留，可能會影響后續(xù)的RT等實驗操作。

 將純化柱轉(zhuǎn)入一個新的離心管中，加30–100 μl RNase-free ddH2O，室溫放置2 min，4℃ 12,000 rpm (~13，上海四步完成RNA提取試劑盒***的選擇,400×g)離心2 min，上海四步完成RNA提取試劑盒***的選擇。

洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30 μl，體積過小影響回收效率。且RNA應(yīng)保存在-70℃，以防降解。

注意：如果想提高RNA得率，可重復(fù)上步操作一次，合并兩次得到的溶液，上海四步完成RNA提取試劑盒***的選擇。 在吸附柱中加入500ul 洗柱液，室溫放置2分鐘，2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min，棄廢液。上海四步完成RNA提取試劑盒***的選擇

向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min，棄廢液。

向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min，棄廢液。

12000rpm離心2min，棄掉收集管，將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。

將吸附柱放入新管中，向膜**滴加50-100ul RNase free ddH2O，室溫放置5min，12000rpm室溫離心2min即得到RNA

所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為RNase-free產(chǎn)品，操作過程要小心，帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。

北京新手RNA提取試劑盒50T/690元實驗者只需要按照說明書上的步驟操作即可。

溶液 RL應(yīng)在2-8℃避光保存，其他溶液和純化柱室溫保存。

注意事項

●  嚴(yán)防操作環(huán)境、使用的容器、耗材和試劑的RNase污染。操作過程中勤換手套。

●  使用本產(chǎn)品提取的RNA一般不含有DNA污染。在極少數(shù)情況下(與組織pH值等相關(guān))，如果有DNA污染而又必須去除，則可以用RNase-free的DNase處理樣品。

●  請嚴(yán)格遵照操作步驟操作。

●  不同起始材料試劑用量及預(yù)期RNA產(chǎn)率。

***次使用前應(yīng)在溶液 RPI、溶液 RW中加入無水乙醇，加入量請參見瓶子上的標(biāo)簽。

RNA提取注意事項（5）

純化得到的RNA可能需要通過沉淀來濃縮，以滿足一些下游應(yīng)用的需要。醋酸銨(NH4OAc) 沉淀（加0.1體積的5 M 醋酸銨、2-2.5體積的無水乙醇，-20°C放置25分鐘以上）可以很好地回收RNA。如果需要定量回收低濃度的RNA（ng/ml），可以采用共沉淀（如linear acrylamide糖原glycogen,、酵母yeast RNA ）的方法。核酸助沉劑是linear acrylamide，當(dāng)RNA用于RT-PCR分析時，線性的丙烯酰胺和DNase處理的糖原都可以作為理想的共沉淀劑，因為它們都不含DNA污染，糖原含量高會制抑PCR反應(yīng)。酵母RNA和未處理的糖原會給樣品帶來核酸污染，有可能影響RT-PCR的結(jié)果。沉淀后，注意避免RNA沉淀過分干燥，因為這可能導(dǎo)致很難重新溶解。

芯片和試劑，對操作人員技術(shù)要求低，全程只需20分鐘，患者等待周期短，成本低。

RNA試劑盒 用于各種植物、動物、微生物的RNA提取，在每個試劑盒里都有一份說明使用說明書。實驗者只需要按照說明書上的步驟操作即可。使用時無需配制其它試劑，非常方便，適合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、純度高，可用于分子生物學(xué)后實驗。但較好的試劑盒價格比較貴，在實驗室可以根據(jù)自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用

（以離心柱型為例）：一般包括：成分?jǐn)?shù)量儲藏溫度有效期裂解液100ml2-8℃一年漂洗液30mlRT一年洗柱液100mlRT一年RNasefreeddH2O30mlRT一年RNasefree吸附柱100個RT一年RNasefree收集管(2ml)100個RT一年此外，還配有一份試劑盒使用說明書，根據(jù)不同的生產(chǎn)商，可能還配有不同的試劑，如：DNA酶、溶菌酶等。 當(dāng)然，就RNA的提取而言，不一定試劑盒的提取效果就非常好。上海四步9分鐘完成RNA提取試劑盒****

為基因檢測企業(yè)的發(fā)展創(chuàng)造了大量機(jī)遇。上海四步完成RNA提取試劑盒***的選擇

本產(chǎn)品中含有苯酚，具0性和腐蝕性。如果吸入體內(nèi)、接觸皮膚、吞食等會引起中毒、灼傷及其他身體傷害。使用時應(yīng)穿戴防護(hù)服裝、手套、面罩等防護(hù)物。如果不小心接觸到眼睛時，應(yīng)立即用大量水沖洗然后前往醫(yī)院進(jìn)行***。

請穿實驗服并佩戴一次性手套進(jìn)行實驗操作，避免 RNase 污染。

使用 RNase-free 的塑料制品和***頭避免交叉污染；所有離心管及相關(guān)溶液都必須無 RNA 酶污染。

請自備氯仿、異丙醇（新開封或提取 RNA **）、75%乙醇（DEPC 處理水配制）、DEPC 和 DEPC 處理水。

使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總 RNA 的效果通常會比新鮮的細(xì)胞或組織差一些，因為凍存過程中細(xì)胞或組織內(nèi)的 RNase 會釋放出來并剪切樣品。推薦：如果不能及時抽提 RNA，先加入適量 Trizol 試劑，裂解樣品然后再凍存，這樣 RNase 就不會降解樣品。 上海四步完成RNA提取試劑盒***的選擇

上海朝瑞生物科技有限公司始建于2003-01-22，坐落于上海市松江區(qū)廣富林路697號昂立大廈2113室，現(xiàn)有員工5~10人余人。zrbiorise,SPRICELL,scienceladde是上海朝瑞生物科技有限公司的主營品牌，是專業(yè)的1.發(fā)布科研技術(shù) 2.發(fā)布應(yīng)用技術(shù) 3.發(fā)布專業(yè)專長 4.發(fā)布科研成果 5.發(fā)布我的需求 6.發(fā)布篩選檢驗檢測服務(wù) 7.發(fā)布協(xié)同代研發(fā)服務(wù) 8.發(fā)布升級改造產(chǎn)品服務(wù) 9.發(fā)布實驗室及儀器設(shè)備共享 10.發(fā)布培訓(xùn)基地共享 11.發(fā)布工廠代加工及共享車間 12.發(fā)布科研/項目團(tuán)隊招聘13.發(fā)布研究生婚戀 14.發(fā)布項目整包服務(wù) 15.發(fā)布資源交換業(yè)務(wù)公司，擁有自己**的技術(shù)體系。公司堅持以客戶為中心、1.發(fā)布科研技術(shù) 2.發(fā)布應(yīng)用技術(shù) 3.發(fā)布專業(yè)專長 4.發(fā)布科研成果 5.發(fā)布我的需求 6.發(fā)布篩選檢驗檢測服務(wù) 7.發(fā)布協(xié)同代研發(fā)服務(wù) 8.發(fā)布升級改造產(chǎn)品服務(wù) 9.發(fā)布實驗室及儀器設(shè)備共享 10.發(fā)布培訓(xùn)基地共享 11.發(fā)布工廠代加工及共享車間 12.發(fā)布科研/項目團(tuán)隊招聘13.發(fā)布研究生婚戀 14.發(fā)布項目整包服務(wù) 15.發(fā)布資源交換業(yè)務(wù)市場為導(dǎo)向，重信譽(yù)，保質(zhì)量，想客戶之所想，急用戶之所急，全力以赴滿足客戶的一切需要。上海朝瑞生物科技有限公司主營業(yè)務(wù)涵蓋[ "科研技術(shù)服務(wù)", "應(yīng)用技術(shù)服務(wù)", "科研成果轉(zhuǎn)化", "科學(xué)產(chǎn)品銷售" ]，堅持“質(zhì)量優(yōu)先、質(zhì)量服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針，贏得廣大客戶的支持和信賴。

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