蜂毒肽可以作用多種酶及細(xì)胞蛋白，在裂解的細(xì)胞中蜂毒肽能結(jié)合或改變幾種蛋白質(zhì)功能。如蜂毒肽可以***蛋白激酶C;與鈣調(diào)蛋白(calmodulin)具有高度親極性。Fukushi-ma 實(shí)驗(yàn)中觀察到蜂毒肽***小鼠大腦皮質(zhì)的突觸膜_上依賴鳥苷酸的腺苷酸環(huán)化酶活性;還發(fā)現(xiàn)蜂毒肽能明顯刺激Gi1和G11活性，但卻***Gs活性。動(dòng)力學(xué)研究表明蜂毒肽***Gs活性是因?yàn)?**GDP的釋放，從而增加了鳥苷酸造成的。而***Gi與***Gs很可能與***腺苷酸環(huán)化酶的活性有關(guān)。細(xì)胞脂酶的活性產(chǎn)物包括三磷酸肌醇(IP3)、甘油二酯(DG)和脂肪酸(FA)等是細(xì)胞生理活動(dòng)重要的第二信使系統(tǒng)，而有實(shí)驗(yàn)表明蜂毒.肽可以***細(xì)胞脂酶，包括磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)，內(nèi)蒙古蜂毒、磷脂酶Az(PLAJ及甘油三酯酶等，內(nèi)蒙古蜂毒。磷脂和甘油三酯是細(xì)胞內(nèi)主要的?；?包含脂肪酸)，內(nèi)蒙古蜂毒。而甘油三酯的相對含量可占細(xì)胞總脂量的5% ~ 60%。

將蜜蜂排除的毒液收集起來便可得到較為純凈的蜂毒。內(nèi)蒙古蜂毒

蜂毒的藥理作用:蜂毒具有***的藥理活性，這是它臨床應(yīng)用的

依據(jù)。

(1)蜂毒對神經(jīng)系統(tǒng)的作用:

蜂毒具有神經(jīng)毒性，全蜂毒及蜂毒肽、蜂毒明肽、托肽平等都具有顯

著的親神經(jīng)特性。蜂毒的中樞性抗膽堿活性和神經(jīng)節(jié)阻滯作用是它**古

老的特性。

A、全蜂毒和蜂毒肽對煙堿型膽堿能受體有選擇性***作用，這是蜂毒

對腦高級部分影響的基礎(chǔ)。早在1971年，奧爾洛夫教授的實(shí)驗(yàn)就已證明

蜂毒能使大白鼠聽源性痙攣發(fā)生率明顯降低，認(rèn)為是蜂毒阻帶網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)

膽堿，反應(yīng)系統(tǒng)，使原發(fā)***理興奮灶在該區(qū)不能形成和阻止其過分***

的刺激傳入的結(jié)果。給大白鼠皮下注射10mg/kg劑里煙堿，**的 鼠出

現(xiàn)特有的痙攣發(fā)作，預(yù)先注射2mgkg劑里的蜂毒或蜂毒肽，煙堿型痙攣

的發(fā)生率降至259%-3%.。預(yù)先給家免注射0.75mg/kg的蜂毒，其煙堿型

痙攣的發(fā)生率由80%降至38.4%，而且潛伏期延長，痙攣持續(xù)時(shí)間縮短。

蜂毒能防止鼠和家免煙堿型痙攣發(fā)生或能使其強(qiáng)度明顯減弱，顯然，蜂

毒抗痙攣?zhàn)饔门c其阻滯中樞性煙堿敏感系統(tǒng)能力關(guān)系極大。 內(nèi)蒙古蜂毒由于蜂毒來源豐富．作用廣，功效大，因此蜂毒的藥理作 用和***價(jià)值將會(huì)有一個(gè)廣悶發(fā)展前景。

1972年，Habermant報(bào)道1μmol/L的蜂毒肽就能阻止**細(xì)胞增殖但卻不***正常細(xì)胞的生長與克隆率。

1983年，Vlasak等用mRNA-DNA逆轉(zhuǎn)錄的方法，利用質(zhì)粒pBR322構(gòu)建了蜂王毒腺的cDNA文庫，用蜂王毒腺總mRNA制作探針從此文庫中分離得到了蜂毒肽的cDNA，再進(jìn)一步將其克隆到質(zhì)粒pUC18上進(jìn)行DNA序列分析，由DNA的序列分析結(jié)果推測出的蜂毒肽序列與實(shí)際測得的完全相同。

1996年，Arora通過對正常大鼠肝細(xì)胞與大鼠肝*細(xì)胞抗缺氧損傷能力的實(shí)驗(yàn)對比，證實(shí)蜂毒肽***磷脂酶A2(PLA2)能夠解除肝*細(xì)胞對缺氧的抵抗。DUnn等將來自于鼠抗人骨髓瘤細(xì)胞和淋巴瘤細(xì)胞表面特異蛋白的抗體SCFV基因同蜂毒肽基因相融合，構(gòu)建了能殺**細(xì)胞的抗***基因，大腸桿菌中融合基因并表達(dá)，精制的抗***顯示了體外殺死**細(xì)胞的效能。 Kindas等從處女蜂王的毒腺中提取得到了總mRNA，發(fā)現(xiàn)蜂毒肽mRNA含大約400個(gè)堿基對和1個(gè)短的polyA尾。 Haase實(shí)驗(yàn)表明蜂毒肽可以***細(xì)胞脂酶，包括磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)、磷脂酶A2(PLA2)及甘油三酯酶等。

王秋波等通過人工合成含特異性酶切位點(diǎn)的AB兩條寡核苦酸片段，在Klenow酶作用下形成目的基因，用限制型內(nèi)切酶HindⅢ，XmnⅠ同時(shí)酶切目的基因和表達(dá)載體Pmal-p2質(zhì)粒，在T4連接酶的作用下構(gòu)建兩者的重組體，通過α-互補(bǔ)篩選出附性克隆，并通過特異性酶切和測序分析進(jìn)行鑒定，獲得重組蜂毒肽的原核表達(dá)克隆。

2003年，劉嶺等通過MTT法對SMMC-7721、BEL-7402和Hep-3B三種肝*細(xì)胞系進(jìn)行研究，考察蜂毒肽*****的量效關(guān)系，結(jié)果顯示:在8~64μg/mL劑量時(shí)，蜂毒肽的抑瘤率直線上升，在體外表現(xiàn)***的抗瘤效果。 ：蜂毒為復(fù)雜混合物，藥理作用比較多，已*** 應(yīng)用于臨床。

一、取毒對象

蜂毒是工蜂尾部毒囊排出的透明毒液(蜂王和雄蜂沒0腺而不能生產(chǎn)蜂毒)，工蜂在剛出房時(shí)毒囊中只有極少量的蜂毒，之后隨著日齡增長毒囊中的毒液也會(huì)逐漸增多，但18日齡后毒囊中的毒液便會(huì)停止增長，此時(shí)1只工蜂大約可以生產(chǎn)0.3毫克蜂毒，因此蜂毒的采集對象主要是18日齡后的成年工蜂。

蜜蜂

二、操作原理

蜂毒**常用的采集方法是電刺激法，原理是工蜂受到弱電流刺激時(shí)會(huì)產(chǎn)生蟄刺和排毒的反射行為，此時(shí)若能將工蜂排出的毒液收集起來便可得到較為純凈的蜂毒，而且電刺激法取毒相對于其他取毒方法而言對工蜂的傷害非常小，采用這種方法取毒后工蜂并不會(huì)死亡，只是工蜂的毒囊中沒0液而已。 主要為蜂毒肽 括 性酶 生物胺、蜂毒肥大細(xì)胞脫粒肽等lO多種活性肽。內(nèi)蒙古蜂毒

蜂毒中富含的蜂毒明肽可直接作用于***系統(tǒng)并能***神經(jīng)興奮。內(nèi)蒙古蜂毒

蜂毒對血液系統(tǒng)的作用:

蜂毒的抗凝作用和溶血作用是其血液毒的主要表現(xiàn)，也是其***

化淤改善微循環(huán)重要環(huán)節(jié)。已證實(shí)蜂毒能增加大白鼠、免皮膚毛細(xì)血

管通性。蜂毒及其組分引起肥大細(xì)胞釋放肝素、組織胺和5-羥色胺等

生理活性物質(zhì)是影響微循環(huán)改變的重要因素。實(shí)驗(yàn)證明，極小里的蜂

毒進(jìn)入人體就能改變***的功能狀態(tài)，且對微循環(huán)有廣譜的生物

學(xué)活性，***開放數(shù)量增加，灌注加強(qiáng)，流速提高，血液的流動(dòng).

性增高，***通透性增加，這些因素綜合作用會(huì)**改善組織代

謝，有效提高組織修復(fù)能力和再生能力。實(shí)驗(yàn)證明，天然蜂毒及其有

效成分蜂毒肽、磷脂酶A具有很好的抗凝作用及纖溶作用。蜂毒對血

液凝固的影響還存在--條神經(jīng)反射通路，用蜂毒灌注實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的隔離

頸動(dòng)脈竇時(shí)，血液凝時(shí)間除延長。 內(nèi)蒙古蜂毒

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