生產(chǎn)工藝為：D-泛解酸鈉溶液 –內(nèi)酯化，得到D-泛解酸內(nèi)酯溶液-溶液減壓濃縮脫除水分-結(jié)晶-固液分離，母液回套至減壓濃縮脫水-D-泛解酸內(nèi)酯成品-β-丙氨酸、氧化鈣、甲醇進(jìn)行鈣化反應(yīng)，生成β-丙氨酸鈣-加入甲醇、D-泛解酸內(nèi)酯進(jìn)行?；磻?yīng)，生成D-泛酸鈣-結(jié)晶、離心- D-泛酸鈣濕粉干燥-整粒，品質(zhì)泛解酸內(nèi)酯產(chǎn)品的辨別方法、包裝入庫。

一種高純度的D?泛酸內(nèi)酯的合成方法包括步驟:將DL?泛酸內(nèi)酯加入到水中,在pH為6，品質(zhì)泛解酸內(nèi)酯產(chǎn)品的辨別方法.0?8.0用酶水解，品質(zhì)泛解酸內(nèi)酯產(chǎn)品的辨別方法,得到D?泛解酸以及L?泛酸內(nèi)酯;將上述水溶液經(jīng)有機(jī)溶劑萃取,得到D?泛解酸的水溶液以及L?泛酸內(nèi)酯有機(jī)溶液。

化還原酶催化不對稱還原制備D-泛解酸內(nèi)酯氧化還原酶不對稱還原酮泛解酸內(nèi)酯的方法。用L-泛解酸內(nèi)酯脫氫酶將L-泛解酸內(nèi)酯氧化成酮泛解酸內(nèi)酯， 再利用酮泛解酸內(nèi)酯還原酶將其不對稱還原成D-泛解酸內(nèi)酯。該方法也可將外消旋的泛解酸內(nèi)酯作為起始原料，經(jīng)過氧化還原反應(yīng)后得到D-泛解酸內(nèi)酯， 過程簡單，不需要化學(xué)法中的再消旋化反應(yīng)。 

制備方法包括以下步驟：(1)將纈氨酸在過氧化氫酶和α?酮異戊酸還原酶的作用下，進(jìn)行酶轉(zhuǎn)化得到α?酮異戊酸；

(2)將所述α?酮異戊酸與四氫葉酸在羥甲基轉(zhuǎn)移酶和氯化鎂的作用下，反應(yīng)制備酮泛解酸；

(3)將所述酮泛解酸在α?酮異戊酸還原酶的作用下，進(jìn)行酶轉(zhuǎn)化得到泛解酸；

(4)將所述泛解酸制備得到泛解酸內(nèi)酯。

該酶已經(jīng)成功的應(yīng)用于工業(yè)化,取得了很好的綜合效益.為了提高D-泛解酸內(nèi)酯水解酶的酶活力及在低pH條件下的穩(wěn)定性,我們在基因水平上對酶進(jìn)行了研究. 利用RT-PCR方法,擴(kuò)增得到了編碼源于串珠鐮孢霉菌(Fusarium moniliforme)CGMCC

0536的D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA,對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,根據(jù)分析結(jié)果設(shè)計(jì)了一對特異引物,成功擴(kuò)增到了編碼D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA的結(jié)構(gòu)基因,結(jié)構(gòu)基因同pMD18-T載體連接后,進(jìn)行測序.D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA結(jié)構(gòu)基因序列已在Genebank數(shù)據(jù)庫申請登記,登記號為AY728018.

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