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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:l-泛解酸內(nèi)酯合成
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KATAOKA M 等于1992 年分離純化出星狀諾卡氏菌生產(chǎn)的L-泛解酸內(nèi)酯脫氫酶, 但比酶活只有0,l-泛解酸內(nèi)酯合成.041 7 U/mg。該菌的基因組信息已被披露,然而至今未有構(gòu)建其L-泛解酸內(nèi)酯脫氫酶基因工程菌的報(bào)道。2009 年,王永澤等利用面包酵母生產(chǎn)酮泛解酸內(nèi)酯還原酶,并利用β-環(huán)糊精結(jié)合底物,l-泛解酸內(nèi)酯合成,減少底物對(duì)菌體的0作用,終產(chǎn)物得率達(dá)45%,光學(xué)純度達(dá)到90%以上。SI D等于2012 年在嗜麥芽寡養(yǎng)單孢菌845 中克隆一個(gè)大小約為30 kDa 的酮泛解酸還原酶,并與葡萄糖脫氫酶共表達(dá)成大腸工程菌,構(gòu)建輔酶循環(huán)體系,l-泛解酸內(nèi)酯合成。該大腸工程菌的酮泛解酸還原酶的比酶活達(dá)到27.7 U/mg。
傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法是化學(xué)拆分法或鈣鹽誘導(dǎo)結(jié)晶法。化學(xué)拆分的缺點(diǎn)是拆分劑太貴,分離困難,步驟多,成本高,還0性和環(huán)境污染問(wèn)題。鈣鹽誘導(dǎo)結(jié)晶法步驟多,收率低,投資大,擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模比較困難。另外,誘導(dǎo)結(jié)晶法不能用于D-泛醇等泛酸衍生物生產(chǎn)。
“微生物酶法拆分制備D-泛解酸內(nèi)酯及用于生產(chǎn)D-泛酸鈣與D-泛醇”項(xiàng)目選育了一株能高產(chǎn)立體專一性D-泛解酸內(nèi)酯水解酶、不利用不降解泛解酸內(nèi)酯或泛解酸的微生物菌株串珠鐮孢霉,建立了國(guó)際**的霉菌交聯(lián)原位固定化方法,酶轉(zhuǎn)化時(shí)間短到3~5小時(shí),效率高,反復(fù)分批酶轉(zhuǎn)化可達(dá)180次以上,所得到的酶水解產(chǎn)物光學(xué)純度達(dá)到99%e.e.以上,因此具有較好的技術(shù)經(jīng)濟(jì)競(jìng)爭(zhēng)力。
化學(xué)酶法合成D-泛解酸內(nèi)酯
泛酸具有一個(gè)手性中心,其中D-泛酸是工業(yè)生產(chǎn)所需要的。化學(xué)法合成D-泛酸(或泛酸鈣)工藝成熟,但步驟繁瑣且對(duì)消旋化產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)晶拆分費(fèi)用昂貴。利用生物酶法生產(chǎn)光學(xué)純的D-泛酸可進(jìn)一步升級(jí)合成工藝,提升產(chǎn)品的競(jìng)爭(zhēng)力。生物酶法主要包括利用生物菌體發(fā)酵生產(chǎn)和酶法催化。生物菌體發(fā)酵法利用基因工程技術(shù)在大腸桿菌、谷氨酸棒狀桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母等宿主菌中表達(dá)泛酸生物合成基因和氨基酸生物合成基因,并利用基因工程菌進(jìn)行微生物發(fā)酵,泛酸產(chǎn)量較高,但微生物發(fā)酵法發(fā)酵液成分復(fù)雜,后續(xù)的產(chǎn)物分離提取較困難。酶法催化可以替代化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中的某些步驟, 以化學(xué)酶法的方式來(lái)實(shí)現(xiàn)D-泛酸的前體物質(zhì)D-泛酸內(nèi)酯的生產(chǎn)。目前國(guó)內(nèi)外酶法催化生產(chǎn)D-泛解酸內(nèi)酯的方法主要包括酶法選擇性拆分和酶法不對(duì)稱合成。關(guān)于酶法不對(duì)稱合成,筆者主要綜述了三種路線:1) 前手性物質(zhì)酮泛解酸或酮泛解酸內(nèi)酯不對(duì)稱還原成D-泛解酸內(nèi)酯;2) 利用(R)-羥基腈裂合酶來(lái)合成泛解酸內(nèi)酯前體羥基特戊醛;3) 醇脫氫酶參與的化學(xué)酶法合成D-泛解酸內(nèi)酯。
文章來(lái)源地址: http://www.cdcfah.com/cp/369715.html
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