D-泛解酸內(nèi)酯水解酶活性篩選系統(tǒng).用該篩選系統(tǒng)以酶活力和pH穩(wěn)定性為指標對突變體庫進行篩選,**終獲得一株酶活力高且在低pH條件下穩(wěn)定性好的突變體Mut E-861.該突變體的酶活力是野生型酶的5.5倍.對突變體和野生型酶在pH

6.0和pH 5.0條件下的殘余酶活進行對比,在這兩種pH條件下,突變體酶的酶活殘留分別為75%和50%,而野生型酶只能保持原來的40%和20%，599-04-2泛解酸內(nèi)酯批發(fā)廠.通過軟件對突變體Mut E-861酶基因和野生型酶基因進行分析對比，599-04-2泛解酸內(nèi)酯批發(fā)廠,發(fā)現(xiàn)突變體Mut E-861酶基因發(fā)生了三處點突變，599-04-2泛解酸內(nèi)酯批發(fā)廠,其中突變使兩處氨基酸取代,另一處為沉默突變,未引起氨基酸的變化.

該項目采用的D－泛酸鈣生產(chǎn)能力微生物酶催化拆分方法，與傳統(tǒng)化學拆分方法相比，以生產(chǎn)D－泛醇為例，原材料消耗減少69．2％，廢液、廢渣排放分別減少65．5％、43．8％，能耗減少12．7％，生產(chǎn)成本降低了26．5％，同時，生物法改善了操作環(huán)境，提高了產(chǎn)品品質(zhì)與產(chǎn)品安全性，提高了D－泛酸生產(chǎn)的整體技術(shù)水平，達到了用高新生物技術(shù)改造傳統(tǒng)化學工業(yè)的目的。

D-泛解酸內(nèi)酯水解酶具有高度的立體選擇性，可立體專一拆分DL-泛解酸內(nèi)酯，生成D-泛解酸。

D-泛酸鈣的制備方法主要有兩種：1)先化學合成DL-泛酸鈣，通過拆分DL-泛酸鈣而制得D-泛酸鈣。2)通過化學法或生物法拆分關(guān)鍵中間體DL-泛解酸內(nèi)酯得到D-泛解酸內(nèi)酯，再由D-泛解酸內(nèi)酯與β--氨基丙酸反應(yīng)合成D-泛酸鈣，其中生物法拆分的成本比化學法拆分的成本低15%。

國外D-泛酸鈣生產(chǎn)公司主要有日本制藥精細化學品公司、德國BASF公司、荷蘭DSM公司等。BASF、DSM均采用化學法生產(chǎn)，而日本***制藥采用生物法酶拆分工藝制備中間體D-泛解酸內(nèi)酯，這也是目前**技術(shù)的工藝。國內(nèi)原只有鑫富藥業(yè)一家有生物法酶拆分工藝，但現(xiàn)在山東新發(fā)也采用了這一工藝。

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