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產(chǎn)品關鍵詞:**泛解酸內酯推薦
***更新:2020-06-27 13:23:32
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詳細說明
D-泛解酸內酯水解酶活性篩選系統(tǒng).用該篩選系統(tǒng)以酶活力和pH穩(wěn)定性為指標對突變體庫進行篩選,**終獲得一株酶活力高且在低pH條件下穩(wěn)定性好的突變體Mut E-861,**泛解酸內酯推薦.該突變體的酶活力是野生型酶的5.5倍.對突變體和野生型酶在pH
6.0和pH 5.0條件下的殘余酶活進行對比,在這兩種pH條件下,突變體酶的酶活殘留分別為75%和50%,**泛解酸內酯推薦,而野生型酶只能保持原來的40%和20%.通過軟件對突變體Mut E-861酶基因和野生型酶基因進行分析對比,**泛解酸內酯推薦,發(fā)現(xiàn)突變體Mut E-861酶基因發(fā)生了三處點突變,其中突變使兩處氨基酸取代,另一處為沉默突變,未引起氨基酸的變化.
KATAOKA M 等于1992 年分離純化出星狀諾卡氏菌生產(chǎn)的L-泛解酸內酯脫氫酶, 但比酶活只有0.041 7 U/mg。該菌的基因組信息已被披露,然而至今未有構建其L-泛解酸內酯脫氫酶基因工程菌的報道。2009 年,王永澤等利用面包酵母生產(chǎn)酮泛解酸內酯還原酶,并利用β-環(huán)糊精結合底物,減少底物對菌體的0作用,終產(chǎn)物得率達45%,光學純度達到90%以上。SI D等于2012 年在嗜麥芽寡養(yǎng)單孢菌845 中克隆一個大小約為30 kDa 的酮泛解酸還原酶,并與葡萄糖脫氫酶共表達成大腸工程菌,構建輔酶循環(huán)體系。該大腸工程菌的酮泛解酸還原酶的比酶活達到27.7 U/mg。
傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法是化學拆分法或鈣鹽誘導結晶法?;瘜W拆分的缺點是拆分劑太貴,分離困難,步驟多,成本高,還0性和環(huán)境污染問題。鈣鹽誘導結晶法步驟多,收率低,投資大,擴大生產(chǎn)規(guī)模比較困難。另外,誘導結晶法不能用于D-泛醇等泛酸衍生物生產(chǎn)。
“微生物酶法拆分制備D-泛解酸內酯及用于生產(chǎn)D-泛酸鈣與D-泛醇”項目選育了一株能高產(chǎn)立體專一性D-泛解酸內酯水解酶、不利用不降解泛解酸內酯或泛解酸的微生物菌株串珠鐮孢霉,建立了國際**的霉菌交聯(lián)原位固定化方法,酶轉化時間短到3~5小時,效率高,反復分批酶轉化可達180次以上,所得到的酶水解產(chǎn)物光學純度達到99%e.e.以上,因此具有較好的技術經(jīng)濟競爭力。
文章來源地址: http://www.cdcfah.com/cp/411594.html
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