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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:Pantolactone泛解酸內(nèi)酯單價(jià),泛解酸內(nèi)酯
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D-泛酸在生物體內(nèi)的代謝途徑已經(jīng)確定,Pantolactone泛解酸內(nèi)酯單價(jià),即經(jīng)α-酮異戊酸,利用酮泛解酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶生成酮泛解酸,再利用酮泛解酸還原酶形成泛解酸,***與β-丙氨酸形成D-泛酸。目前,國(guó)內(nèi)對(duì)維生素B5 的年需求量達(dá)2 000 t 以上,而全球年需求量達(dá)10 000 t以上
化學(xué)法合成D-泛解酸內(nèi)酯,從低廉原料出發(fā)經(jīng)多步反應(yīng)合成,工藝成熟,但總體存在化學(xué)條件
嚴(yán)苛,Pantolactone泛解酸內(nèi)酯單價(jià)、酸堿用量大和能耗較高等問(wèn)題,Pantolactone泛解酸內(nèi)酯單價(jià)。生物技術(shù)的發(fā)展為生物酶法合成D-泛解酸內(nèi)酯提供了充分的可行性。目前工業(yè)化合成D-泛解酸內(nèi)酯采用的是化學(xué)法與水解酶拆分法相結(jié)合的技術(shù)路線。
將所述α?酮異戊酸與四氫葉酸在羥甲基轉(zhuǎn)移酶和氯化鎂的作用下,反應(yīng)制備酮泛解酸。Pantolactone泛解酸內(nèi)酯單價(jià)
將D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA結(jié)構(gòu)基因分別插入到大腸桿菌胞內(nèi)表達(dá)載體pTrc99a和分泌表達(dá)載體pET20b中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pTrc99a-LAC和pET20b-LAC.將重組載體pTrc99a-LAC轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109.重組菌在IPTG誘導(dǎo)下表達(dá)出有活性的重組酶,經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè),重組大腸桿菌有分子量約為40 kD的蛋白表達(dá)帶,重組酶活力平均為39 U/克濕細(xì)胞.將分泌重組載體pET20b-LAC轉(zhuǎn)化大腸桿菌BLR(DE3)pLysS,利用IPTG對(duì)重組菌進(jìn)行誘導(dǎo),D-泛解酸內(nèi)酯水解酶被分泌表達(dá)至大腸桿菌的周質(zhì)空間,信號(hào)肽被正確識(shí)別切下后,獲得活性的D-泛解酸內(nèi)酯。D-泛解酸內(nèi)酯高純泛解酸內(nèi)酯性價(jià)比高企業(yè)化合物英文學(xué)名 (D)-Pantolactone 。
D-泛酸鈣,化學(xué)名為N-(α,γ-二羥基-β,β-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸鈣,俗稱維生素B5,是輔酶A的組成部分,它是人體和動(dòng)物維持正常生理機(jī)能不可缺少的物質(zhì),廣泛應(yīng)用于飼料、醫(yī)藥、食品等工業(yè)。
D-泛醇,俗稱維生素原B5,是一種優(yōu)異的皮膚與頭發(fā)保護(hù)劑,可使皮膚保持柔嫩、毛發(fā)光亮油潤(rùn),廣泛應(yīng)用在護(hù)發(fā)產(chǎn)品和化妝品中,還可用于醫(yī)藥、保健食品等領(lǐng)域。
D-泛酸鈣的制備方法主要有以下兩種。
一種是先化學(xué)合成DL-泛酸鈣,通過(guò)拆分DL-泛酸鈣而制得D-泛酸鈣。
另一種是通過(guò)化學(xué)法或生物法拆分關(guān)鍵中間體DL-泛解酸內(nèi)酯得到D-泛解酸內(nèi)酯,再由D-泛解酸內(nèi)酯與β--氨基丙酸反應(yīng)合成D-泛酸鈣。
D-泛醇由D-泛解酸內(nèi)酯與β--氨基丙醇反應(yīng)制得。
一種微生物新菌株內(nèi)生***HL-02 (PlectospHaereella cucumerina HL-2)及其在微生物轉(zhuǎn)化制備D-泛解 酸內(nèi)酯中的應(yīng)用,所述的應(yīng)用以DL-泛解酸內(nèi)酯為底物,以內(nèi)生*** HL-2發(fā)酵所得菌液或菌液制備的初酶液為酶源,20~45℃下,在含有 氯化鈣的Tris-HCl緩沖溶液的反應(yīng)體系中進(jìn)行水解反應(yīng)得水解液,取 水解液用乙酸乙酯進(jìn)行酯化反應(yīng),反應(yīng)液經(jīng)后處理制得D-泛解酸內(nèi) 酯;本發(fā)明提供了一株新的可產(chǎn)D-泛解酸內(nèi)酯水解酶的微生物菌種 內(nèi)生***HL-2,該菌種應(yīng)用于拆分DL-泛解酸內(nèi)酯,立體選擇性好, 反應(yīng)條件溫和。DL-泛解酸內(nèi)酯再在串珠鐮孢霉菌的作用下生成D-泛解酸,經(jīng)內(nèi)酯化獲得D-泛解酸內(nèi)酯。
微生物選擇性的不對(duì)稱水解DL-泛解酸內(nèi)酯中的D-泛解酸內(nèi)酯,得到D-泛解酸,再將D-泛解酸進(jìn)行內(nèi)酯化生產(chǎn)D-泛解酸內(nèi)酯。該方法工藝控制簡(jiǎn)單,微生物酶專一性好,可以得到高光學(xué)純度的D-泛解酸內(nèi)酯。
利用D-泛解酸內(nèi)酯水解酶N末端序列,并根據(jù)NCBI中公布的D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA序列設(shè)計(jì)了一個(gè)特異引物,該引物結(jié)合Oligo(dT)15,以串珠鐮孢霉(Fusarium moniliforme)CGMCC 0536 mRNA反轉(zhuǎn)錄得到的總cDNA為模板進(jìn)行擴(kuò)增,獲得約1.5kb左右的片段,將其克隆到T載體上進(jìn)行測(cè)序,對(duì)測(cè)得的序列進(jìn)行分析,重新設(shè)計(jì)了一對(duì)引物,并在引物兩端分別加上限制酶EcoRI和SalI的識(shí)別位點(diǎn)序列,利用熱啟動(dòng)PCR成功地?cái)U(kuò)增出了D-泛解酸內(nèi)酯水解酶基因, 99%含量的泛解酸內(nèi)酯。高純泛解酸內(nèi)酯性價(jià)比高企業(yè)
化合物中文學(xué)名 D-(-)-泛酰內(nèi)酯。Pantolactone泛解酸內(nèi)酯單價(jià)
該酶已經(jīng)成功的應(yīng)用于工業(yè)化,取得了很好的綜合效益.為了提高D-泛解酸內(nèi)酯水解酶的酶活力及在低pH條件下的穩(wěn)定性,我們?cè)诨蛩缴蠈?duì)酶進(jìn)行了研究. 利用RT-PCR方法,擴(kuò)增得到了編碼源于串珠鐮孢霉菌(Fusarium moniliforme)CGMCC
0536的D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA,對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,根據(jù)分析結(jié)果設(shè)計(jì)了一對(duì)特異引物,成功擴(kuò)增到了編碼D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA的結(jié)構(gòu)基因,結(jié)構(gòu)基因同pMD18-T載體連接后,進(jìn)行測(cè)序.D-泛解酸內(nèi)酯水解酶cDNA結(jié)構(gòu)基因序列已在Genebank數(shù)據(jù)庫(kù)申請(qǐng)登記,登記號(hào)為AY728018. Pantolactone泛解酸內(nèi)酯單價(jià)
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